Прислать материал
Синтез и выявление наиболее активных противоопухолевых пептидов, аналогов гипоталамического гормона соматостатина.
Докладчик: Хачатрян Дереник Саркисович
Должность: Заведующий лаборатории, Старший научный сотрудник
Цель проекта:
- Создание новых эффективных препаратов для лечения гормонозависимых опухолей среди коротких пептидов в рамках ПНИ новых аналогов соматостатина. - Оценка перспективности использования химических соединений, относящихся к классу коротких пептидов для создания новых лекарственных средств.
Основные планируемые результаты проекта:
Выполнена программа по первому этапу прикладного научного исследования по теме «Синтез и выявление наиболее активных противоопухолевых пептидов, аналогов гипоталамического гормона соматостатина».
В соответствии с Планом-графиком проведен аналитический обзор современной литературы, затрагивающий научно-техническую проблему, исследуемую в рамках темы ПНИ, проведены патентные исследования по ГОСТ 15.011-96.
На основании литературных данных проведён выбор вариантов модифицированных аналогов пентапептида – фрагмента применяемого циклического противоопухолевого пептида Октреотида и выбор стратегии синтеза пентапептидов.
Разработаны оптимальные методы получения защищённых аминокислот - блоков для синтеза аналогов пентапептида. Найдены и оптимизированы методы, позволяющие получать защищённые аминокислоты с хорошими выходами и высокими показателями качества, при наименьшей затрате средств, времени и усилий. Исследованы возможности получения защищённых аминокислот однореакторным методом, включающим в себя две стадии синтеза. В результате исследований разработаны новые однореакторные методы синтеза двух защищённых аминокислот: ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина и N-трет-бутилоксикарбонил-1,3-L-тиазолидин-4-карбоновой кислоты. Оптимизированы условия синтеза всех защищённых аминокислот. Исследовано влияние на выход использование различных реагентов и их соотношение.
На основании исследования методов получения защищённых аминокислот разработаны «Лабораторные методики синтеза защищённых аминокислот», по которым изготовлены 7 образцов различных защищённых аминокислот в количествах, достаточных для разработки лабораторной методики синтеза пентапептидов и изготовления образцов пентапептидов.
Проведён выбор аналитических параметров, характеризующих чистоту защищённых аминокислот. Основным аналитическим методом определения чистоты синтезируемых соединений выбран метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, совмещённой с масс-спектрометрией. Разработаны методы контроля чистоты защищённых аминокислот и на основе результатов исследований составлены «Методики контроля чистоты защищённых аминокислот».
Полученные образцы аминокислот были идентифицированы и определена их чистота.
Таким образом, выполнена основная задача первого этапа – разработка методик получения, синтез и определение качества защищённых аминокислот, которые являются блоками для синтеза противоопухолевых пентапептидов.
В соответствии с Планом-графиком проведен аналитический обзор современной литературы, затрагивающий научно-техническую проблему, исследуемую в рамках темы ПНИ, проведены патентные исследования по ГОСТ 15.011-96.
На основании литературных данных проведён выбор вариантов модифицированных аналогов пентапептида – фрагмента применяемого циклического противоопухолевого пептида Октреотида и выбор стратегии синтеза пентапептидов.
Разработаны оптимальные методы получения защищённых аминокислот - блоков для синтеза аналогов пентапептида. Найдены и оптимизированы методы, позволяющие получать защищённые аминокислоты с хорошими выходами и высокими показателями качества, при наименьшей затрате средств, времени и усилий. Исследованы возможности получения защищённых аминокислот однореакторным методом, включающим в себя две стадии синтеза. В результате исследований разработаны новые однореакторные методы синтеза двух защищённых аминокислот: ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина и N-трет-бутилоксикарбонил-1,3-L-тиазолидин-4-карбоновой кислоты. Оптимизированы условия синтеза всех защищённых аминокислот. Исследовано влияние на выход использование различных реагентов и их соотношение.
На основании исследования методов получения защищённых аминокислот разработаны «Лабораторные методики синтеза защищённых аминокислот», по которым изготовлены 7 образцов различных защищённых аминокислот в количествах, достаточных для разработки лабораторной методики синтеза пентапептидов и изготовления образцов пентапептидов.
Проведён выбор аналитических параметров, характеризующих чистоту защищённых аминокислот. Основным аналитическим методом определения чистоты синтезируемых соединений выбран метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, совмещённой с масс-спектрометрией. Разработаны методы контроля чистоты защищённых аминокислот и на основе результатов исследований составлены «Методики контроля чистоты защищённых аминокислот».
Полученные образцы аминокислот были идентифицированы и определена их чистота.
Таким образом, выполнена основная задача первого этапа – разработка методик получения, синтез и определение качества защищённых аминокислот, которые являются блоками для синтеза противоопухолевых пентапептидов.
Назначение и область применения, эффекты от внедрения результатов проекта:
Создание новых высокоэффективных малотоксичных антиопухолевых препаратов - агонистов соматостатиновых рецепторов, пентапептидов связано с решением трёх основных задач:
1) разработкой удобного метода их получения, исходя из следующих требований: доступность исходного сырья, мягкие условия проведения синтеза, минимальное число стадий, минимизация работы с высокотоксичными веществами, простота аппаратурного оформления;
2) исследованием физико-химических свойств промежуточных (защищённые аминокислоты, ди-, три-, тетрапептиды) и конечных продуктов (пентапептиды) нахождение достоверных методов контроля их идентичности и чистоты.
3) исследованием противоопухолевой активности пентапептидов in vitro испытанием на различных опухолевых клетках, нахождение наиболее перспективных противоопухолевых субстанций .
Для решения поставленных задач на основании обобщенных данных аналитического обзора будут выбраны оптимальные методы получения пентапептидов и промежуточных соединений для их синтеза и разработаны лабораторные методики. Ожидаемые преимущества разработанных лабораторных методик: проведение синтеза в мягких условиях с высоким выходами, с минимальным числом технологических стадий, с использованием доступного сырья и без использования сложного аппаратурно-технического оформления. На втором этапе будут проведены физико-химические исследования чистоты полупродуктов и целевых пентапептидов. Разработаны методы очистки конечных пентапептидов. Будут проведены исследования противоопухолевой активности пентапептидов in vitro испытанием на различных линиях опухолевых клеток, будут найдены наиболее перспективне противоопухолевые субстанции.
1) разработкой удобного метода их получения, исходя из следующих требований: доступность исходного сырья, мягкие условия проведения синтеза, минимальное число стадий, минимизация работы с высокотоксичными веществами, простота аппаратурного оформления;
2) исследованием физико-химических свойств промежуточных (защищённые аминокислоты, ди-, три-, тетрапептиды) и конечных продуктов (пентапептиды) нахождение достоверных методов контроля их идентичности и чистоты.
3) исследованием противоопухолевой активности пентапептидов in vitro испытанием на различных опухолевых клетках, нахождение наиболее перспективных противоопухолевых субстанций .
Для решения поставленных задач на основании обобщенных данных аналитического обзора будут выбраны оптимальные методы получения пентапептидов и промежуточных соединений для их синтеза и разработаны лабораторные методики. Ожидаемые преимущества разработанных лабораторных методик: проведение синтеза в мягких условиях с высоким выходами, с минимальным числом технологических стадий, с использованием доступного сырья и без использования сложного аппаратурно-технического оформления. На втором этапе будут проведены физико-химические исследования чистоты полупродуктов и целевых пентапептидов. Разработаны методы очистки конечных пентапептидов. Будут проведены исследования противоопухолевой активности пентапептидов in vitro испытанием на различных линиях опухолевых клеток, будут найдены наиболее перспективне противоопухолевые субстанции.
Текущие результаты проекта:
Выполнена программа по первому этапу прикладного научного исследования по теме «Синтез и выявление наиболее активных противоопухолевых пептидов, аналогов гипоталамического гормона соматостатина».
В соответствии с Планом-графиком проведен аналитический обзор современной литературы, затрагивающий научно-техническую проблему, исследуемую в рамках темы ПНИ, проведены патентные исследования по ГОСТ 15.011-96.
На основании литературных данных проведён выбор вариантов модифицированных аналогов пентапептида – фрагмента применяемого циклического противоопухолевого пептида Октреотида и выбор стратегии синтеза пентапептидов.
Разработаны оптимальные методы получения защищённых аминокислот - блоков для синтеза аналогов пентапептида. Найдены и оптимизированы методы, позволяющие получать защищённые аминокислоты с хорошими выходами и высокими показателями качества, при наименьшей затрате средств, времени и усилий. Исследованы возможности получения защищённых аминокислот однореакторным методом, включающим в себя две стадии синтеза. В результате исследований разработаны новые однореакторные методы синтеза двух защищённых аминокислот: ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина и N-трет-бутилоксикарбонил-1,3-L-тиазолидин-4-карбоновой кислоты. Оптимизированы условия синтеза всех защищённых аминокислот. Исследовано влияние на выход использование различных реагентов и их соотношение.
На основании исследования методов получения защищённых аминокислот разработаны «Лабораторные методики синтеза защищённых аминокислот», по которым изготовлены 7 образцов различных защищённых аминокислот в количествах, достаточных для разработки лабораторной методики синтеза пентапептидов и изготовления образцов пентапептидов.
Проведён выбор аналитических параметров, характеризующих чистоту защищённых аминокислот. Основным аналитическим методом определения чистоты синтезируемых соединений выбран метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, совмещённой с масс-спектрометрией. Разработаны методы контроля чистоты защищённых аминокислот и на основе результатов исследований составлены «Методики контроля чистоты защищённых аминокислот». Полученные образцы аминокислот были идентифицированы и определена их чистота.
В соответствии с Планом-графиком проведен аналитический обзор современной литературы, затрагивающий научно-техническую проблему, исследуемую в рамках темы ПНИ, проведены патентные исследования по ГОСТ 15.011-96.
На основании литературных данных проведён выбор вариантов модифицированных аналогов пентапептида – фрагмента применяемого циклического противоопухолевого пептида Октреотида и выбор стратегии синтеза пентапептидов.
Разработаны оптимальные методы получения защищённых аминокислот - блоков для синтеза аналогов пентапептида. Найдены и оптимизированы методы, позволяющие получать защищённые аминокислоты с хорошими выходами и высокими показателями качества, при наименьшей затрате средств, времени и усилий. Исследованы возможности получения защищённых аминокислот однореакторным методом, включающим в себя две стадии синтеза. В результате исследований разработаны новые однореакторные методы синтеза двух защищённых аминокислот: ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина и N-трет-бутилоксикарбонил-1,3-L-тиазолидин-4-карбоновой кислоты. Оптимизированы условия синтеза всех защищённых аминокислот. Исследовано влияние на выход использование различных реагентов и их соотношение.
На основании исследования методов получения защищённых аминокислот разработаны «Лабораторные методики синтеза защищённых аминокислот», по которым изготовлены 7 образцов различных защищённых аминокислот в количествах, достаточных для разработки лабораторной методики синтеза пентапептидов и изготовления образцов пентапептидов.
Проведён выбор аналитических параметров, характеризующих чистоту защищённых аминокислот. Основным аналитическим методом определения чистоты синтезируемых соединений выбран метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, совмещённой с масс-спектрометрией. Разработаны методы контроля чистоты защищённых аминокислот и на основе результатов исследований составлены «Методики контроля чистоты защищённых аминокислот». Полученные образцы аминокислот были идентифицированы и определена их чистота.