Регистрация / Вход
Прислать материал

Разработка комплексных тест-систем на основе массированного секвенирования генов Т- и B-клеточного рецептора для мониторинга минимальной остаточной болезни при терапии острых лейкозов у детей

Аннотация скачать
Постер скачать
Презентация скачать
Ключевые слова:
острый лимфобластный лейкоз, минимальная остаточная болезнь, т-клеточный рецептор, в-клеточный рецептор, массированное секвенирование днк

Цель проекта:
1. Высокоточное и высокочувствительное определение минимальной остаточной болезни (МОБ) – индивидуальных клонов опухолевых лимфобластов – у пациентов с острыми лейкозами представляет одну из наиболее острых проблем современной онкогематологии. Поскольку даже незначительное количество опухолевых клеток лимфобластных клонов обуславливает высокий риск рецидива заболевания, мониторинг МОБ абсолютно необходим для выбора эффективных индивидуализированных программ лечения острых лейкозов в современной клинической практике. 2. Цель проекта - разработка комплексных тест-систем для мониторинга минимальной остаточной болезни при терапии острых лейкозов у детей.

Основные планируемые результаты проекта:
1. Основные результаты включают:
- Создание новых диагностических тест-систем, сочетающих использование ранжированного набора специализированных олигонуклеотидных ПЦР-праймеров и оригинальных модификаций высокотехнологичных молекулярно-биологических методов.
- Разработка уникального пакета программного обеспечения, предназначенного для высокоточного комплексного количественного анализа клональной вариабельности лимфоцитов организма человека по результатам массированного секвенирования генов Т- и В-клеточных рецепторов.
- Получение уникального массива данных о медико-биологических закономерностях развития минимальной остаточной болезни у детей с острыми лейкозами.
- Создание методических рекомендаций и регламента применения разработанных тест-систем для проведения клинических анализов и составления технического задания и проведения НИОКР на базе Федерального научно-клинического центра детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева.
2. Создаваемые высокочувствительные тест-системы основаны на использовании оригинального подхода к измерению минимальной остаточной болезни, который полностью удовлетворяет следующим требованиям:
- универсальность  возможность идентификации по крайней мере одного информативного маркера у каждого пациента;
- высокая специфичность выявляемого маркера и чувствительность его детекции  способность идентификации одной опухолевой из 100 000 анализируемых клеток;
- стабильность детектируемого маркера для каждого опухолевого клона и каждого пациента;
- надёжность методики – безусловная воспроизводимость результатов детекции маркера и уровня минимальной остаточной болезни;
- масштабируемость методики  возможность обработки значительного количества проб без пропорционального увеличения трудозатрат.

Краткая характеристика создаваемой/созданной научной (научно-технической, инновационной) продукции:
1. Конечный продукт представляет комплексные тест-системы, основанные на использовании ранжированного набора специализированных олигонуклеотидных ПЦР-праймеров и применении модифицированных методов массированного секвенирования генов Т- и В-клеточных рецепторов, для высокоэффективного мониторинга минимальной остаточной болезни у пациентов с острыми лейкозами.
2. Наборы и способ ранжирования олигонуклеотидных праймеров, методики пробоподготовки и биоинформатического анализа результатов массированного секвенирования представляют оригинальные разработки авторов проекта
3. Проект соответствует мировому научно-техническому уровню в данной области.
4. Разработка комплексных технологических процедур идентификации и количественного определения молекулярно-генетических маркеров опухолевых лимфобластов является наиболее перспективным подходом к мониторингу минимальной остаточной болезни.

Назначение и область применения, эффекты от внедрения результатов проекта:
1. Основными областями применения являются:
• здравоохранение - клинические центры и диспансеры, клинико-диагностические лаборатории, специализирующиеся на диагностике и лечении онкологических заболеваний крови;
• фундаментальная и отраслевая наука - научно-исследовательские организации, изучающие молекулярно-генетические аспекты возникновения, развития и терапии острых лейкозов.
2. Проектом предусмотрено проведения НИОКР на базе Федерального научно-клинического центра детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева. Внедрение разрабатываемых тест-систем в широкую клиническую практику позволит снизить долю неизлечимых пациентов и снизить уровень ранней инвалидизации детей, способствуя повышению эффективности отечественной медицины и качества жизни онкологических больных.
3. Успешное выполнение планируемых исследований, разработка и использование инновационных тест-систем способны существенно ускорить внедрение отечественными клиническими центрами современных способов персонифицированной лекарственной и трансплантационной терапии острых детских лейкозов.
4. Теоретически достижимые характеристики создаваемых тест-систем превосходят опубликованные к настоящему времени аналоги. За счёт высоких технических характеристик разрабатываемые тест системы имеют экспортный потенциал.

Текущие результаты проекта:
1. разработана методика идентификации и количественного определения маркеров наличия опухолевых Т-лимфобластов;
2. разработана методика идентификации и количественного определения маркеров наличия опухолевых В-лимфобластов;
3. завершено создание коллекции клинических образцов костного мозга и лейкоцитарных фракций крови от 100 пациентов с острым лейкозом