Регистрация / Вход
Прислать материал

Молекулярная диагностика бактериальных и вирусных фитопатогенов винограда, актуальных для сельского хозяйства Крыма.

Аннотация скачать
Постер скачать
Ключевые слова:
тест-системы, диагностика, фитопатогены, вирусы, бактерии, виноград, крым, посадочный материал, интегрированная защита растений, rt-pcr, pcr, bio-pcr, секвенирование днк, vitis vinifera

Цель проекта:
Целью проекта является разработка тест-систем диагностики возбудителей вирусных и бактериальных болезней винограда, распространенных на территории Крыма, для отбора посадочного материала и интегрированной защиты растений. Задачи проекта: 1) анализ разнообразия и распространенности на территории Крымского полуострова вирусных и бактериальных фитопатогенов 2) разработка тест-систем для диагностики вирусных и бактериальных фитопатогенов.

Основные планируемые результаты проекта:
В результате выполнения будут разработаны:
1. Информационная база данных распространения вирусных и бактериальных заболеваний винограда на территории Крыма.
2. Макеты тест-систем для идентификации возбудителей вирусных и бактериальных заболеваний винограда, распространенных на территории Крыма.
3. Лабораторные технологические регламенты изготовления тест-систем для идентификации возбудителей вирусных и бактериальных заболеваний винограда, распространенных на территории Крыма.
4. Проекты инструкций по применению тест-систем для идентификации возбудителей вирусных и бактериальных заболеваний винограда, распространенных на территории Крыма.
5. Проекты технических условий на тест-системы для идентификации возбудителей вирусных и бактериальных заболеваний винограда, распространенных на территории Крыма.
6. Технические требования и предложения по разработке, производству и эксплуатации продукции с учетом технологических возможностей и особенностей индустриального партнера - организации реального сектора экономики.
7. Проект технического задания на проведение ОКР по теме: Разработка комплексных тест-систем для идентификации и анализа прогрессирующих, в том числе карантинных, вирусных и бактериальных фитопатогенов в Крыму.

Краткая характеристика создаваемой/созданной научной (научно-технической, инновационной) продукции:
Принцип действия разрабатываемых тест-систем должен быть основан на определении специфичных нуклеотидных последовательностей геномов фитопатогенов. Специальные реагенты должны обеспечивать идентификацию нуклеиновых кислот вирусных и бактериальных фитопатогенов винограда со специфичностью и чувствительностью не менее 90%. Макет тест-системы для идентификации вирусного и бактериального заболевания винограда должен содержать: специальные реагенты; инструкцию по применению тест-системы для идентификации возбудителя вирусного заболевания винограда; проект технических условий на тест-систему для идентификации возбудителя вирусного заболевания винограда, распространенного на территории Крыма.

Назначение и область применения, эффекты от внедрения результатов проекта:
Проект направлен на обеспечение безопасности сельскохозяйственного производства и продовольственной безопасности России. Основные области применения и способы использования результатов проекта следующие: 1) Сельскохозяйственное производство: для выбора здоровых растений для получения черенков; отбора здорового посадочного материала при закладке новых посадок винограда; выбраковки зараженных растений в существующих посадках винограда, определения зараженности растений-резерваторов патогенов и их переносчиков; интегрированной защиты растений, включающей контроль распространения патогенов, вредителей, сорных и дикорастущих растений- резерваторов для фитопатогенных вирусов и бактерий. 2 ) Развитие инструментальных молекулярно- биологических методов диагностики вирусных и бактериальных фитопатогенов. 3) Изучение динамики развития болезней винограда, изменений генетической структуры популяций фитопатогенных организмов, взаимоотношений фитопатогенов и их переносчиков и резерваторов. 4) Краткосрочный и долгосрочный прогноз развития вирусных и бактериальных болезней винограда в условиях Крыма и оценка ущерба, наносимого производству винограда болезнями и вредителями.

Текущие результаты проекта:
При выполнении работ, запланированных на 2 и 3 этап проекта в 2015 году были получены следующие результаты:
1. Обследованы виноградники на наличие растений с внешними признаками поражения вирусными и бактериальными инфекциями (хозяйства Симферопольского района: «АПК Виноградное», «ООО Янтарный», «Заветное»; Судакского района: «Морское», «Судак», «Солнечная долина»; района г. Алушты: «Таврида», «Приветное», «Алушта»; района г. Ялты: «Ливадия», «Таврия»). Отобрано более 650 образцов растительного материала с внешними признаками вирусных и бактериальных заболеваний.
2. С образцов листьев и фрагментов лозы винограда выделены фитопатогенные бактерии, определена их видовая принадлежность, изоляты охарактеризованы биохимически, микробиологически, проведен молекулярный анализ. Среди обнаруженных бактерий одними из наиболее вредоносных являются бактерии рода Agrobacterium.
3. Проведен ОТ-ПЦР анализ всех отобранных образцов на наличие семи наиболее экономически важных вирусов винограда. Среди обнаруженных вирусов присутствуют: Grapevine rupestris stem pitting-associated virus, Grapevine fanleaf virus, Grapevine virus A, Grapevine leafroll - associated viruses – 1 и 3.
4. Создана референтная коллекция фитопатогенных бактерий и вирусов винограда для распространенных на территории Крыма видов фитопатогенов.
5. Сконструированы олигонуклеотидные праймеры для выявления обнаруженных вирусных и бактериальных фитопатогенов винограда.
6. Проведены дополнительные патентные исследования.