Регистрация / Вход
Прислать материал

Разработка тест-системы для выявления и анализа лекарственной устойчивости инфекционных агентов, приводящих к нарушениям репродуктивных функций.

Аннотация скачать
Постер скачать
Презентация скачать
Ключевые слова:
тест-система для диагностики in vitro, инфекционные агенты, заболевания урогенитального тракта, нарушение репродуктивных функций человека, генетические детерминанты лекарственной устойчивости, молекулярно-генетический метод, мультиплексный анализ нуклеотидных последовательностей, днк-чипы

Цель проекта:
Целью проекта является разработка тест-системы на основе ДНК-чипов для идентификации возбудителей инфекций, приводящих к нарушению репродуктивных функций (ИПНРФ) с одновременным определением генетических детерминант устойчивости к спектру антимикробных препаратов.

Основные планируемые результаты проекта:
Планируемыми результатами проекта являются: 1) макет тест-системы для идентификации возбудителей инфекций, приводящих к нарушению репродуктивных функций (ИПНРФ) с одновременным определением генетических детерминант устойчивости к спектру антимикробных препаратов (далее – тест-система); 2) эскизная конструкторская документация на макет тест-системы; 3) лабораторный технологический регламент изготовления тест-системы для выявления возбудителей ИПНРФ; 4) проект инструкции по применению тест-системы для выявления возбудителей ИПНРФ; 5) проект методических рекомендаций по использованию разработанной тест-системы в клинико-диагностических лабораториях учреждений дерматовенерологического профиля РФ; 6) технические требования и предложения по разработке, производству и эксплуатации продукции с учетом технологических возможностей и особенностей индустриального партнера – организации реального сектора экономики (ООО "Биочип-ИМБ"); 7) проект технического задания на проведение ОКР по теме "Разработка и выпуск опытных образцов тест-системы для выявления и анализа лекарственной устойчивости инфекционных агентов, приводящих к нарушениям репродуктивных функций".

Краткая характеристика создаваемой/созданной научной (научно-технической, инновационной) продукции:
Принцип действия разрабатываемой тест-системы основан на молекулярно-генетическом анализе геномной ДНК бактериальных возбудителей ИПНРФ, выделенных из клинического материала. Молекулярно-генетический анализ геномной ДНК реализуется посредством определения специфичных нуклеотидных последовательностей с использованием регистрации сигналов гибридизационных комплексов от исследуемых фрагментов геномов с иммобилизованными на подложке олигонуклеотидами. Количество одновременно идентифицируемых возбудителей ИПНРФ составляет 17 видов, а количество одновременно выявляемых молекулярных детерминант их устойчивости к антибиотикам – не менее 30. Аналитическая чувствительность метода составляет от 1000 геном-эквивалентов ДНК на одну реакцию, чувствительность и специфичность при идентификации возбудителей ИПНРФ – не менее 95%, при идентификации генетических детерминант устойчивости к антибиотикам – не менее 90%. По данным параметрам разрабатываемая тест-система соответствует лучшим мировым аналогам, а по технологичности выполнения и экономической эффективности существенно их превосходит.

Назначение и область применения, эффекты от внедрения результатов проекта:
Результатом проекта явится разработка чувствительной и специфичной тест-системы и технологии ее использования в сфере здравоохранения, а именно при проведении идентификации широкого спектра возбудителей ИПНРФ с одновременным обнаружением маркеров их антибиотикорезистентности. Решение данной задачи позволит существенно повысить качество лабораторной диагностики ИПНРФ и эффективность последующего лечения за счет выбора варианта персонализированной антибиотикотерапии. Расширенное внедрение и использование разрабатываемой тест-системы в медицинских организациях позволит избежать осложнений от инфекций, передаваемых преимущественно половым путём и приводящих к нарушению репродуктивных функций, что в перспективе позитивно скажется на демографической ситуации в Российской Федерации. Экономический и технологический эффект от внедрения результатов проекта заключается в организации на территории РФ инновационного производства ДНК-чипов, в том числе решающего задачу импортозамещения высокотехнологичной продукции медицинского назначения.

Текущие результаты проекта:
Сконструирован, синтезирован и испытан полный комплект специальных реагентов (олигонуклеотидов для иммобилизации на ДНК-чипе и праймеров для амплификации) для идентификации 17 возбудителей ИПНРФ (СР-1, всего – 65 ед.) с одновременным определением 49 детерминант устойчивости (СР-2, всего – 175 ед.) к 8 классам антимикробных препаратов. Разработаны и изготовлены ДНК-чипы, содержащие олигонуклеотидные зонды из состава СР-1 и СР-2. Проведена оптимизация процедур мультиплексной амплификации и последующей гибридизации на ДНК-чипе. Сформирована коллекция образцов ДНК возбудителей ИПНРФ в количестве 300 ед. для проведения испытаний компонентов и макета разработанной тест-системы. Диагностические характеристики СР по результатам испытаний составили: чувствительность СР-1 – 96,8%; СР-2 – 91,94%; специфичность СР-1 – 99,4%; СР-2 – 97,80%, что полностью соответствует заявленным параметрам.