Определение длины теломер на отдельных плечах индивидуальных хромосом при ревматоидном артрите

Длина теломер является важным индикатором пролиферативной истории и потенциала клеток. Уменьшение длины теломер в клетках иммунной системы отражает их раннее старение при заболеваниях аутоиммунной природы и хронических воспалительных заболеваниях. В наших предыдущих работах было показано, что происходит укорочение средней длины теломер в мононуклеарах периферической крови при ревматоидном артрите (РА). Однако теломерные повторы распределены в клетке неоднородно, и показатель длины теломер отличается на разных хромосомах. Предполагается, что такие различия в длине теломер индивидуальных хромосом, называемые теломерным профилем, являются врождённой чертой и могут оказывать влияние на патогенез иммуноопосредованных заболеваний.

Целью настоящей работы было изучение длины теломер на отдельных плечах индивидуальных хромосом пациентов с РА в сравнении со здоровыми донорами.

Работа проводилась на мононуклеарах периферической крови, полученных от пациентов с РА и здоровых доноров. У всех испытуемых бралось информированное медицинское согласие на исследование. Относительное количество теломерных повторов на отдельных плечах индивидуальных хромосом оценивалось методом количественной флуоресцентной гибридизации in situ (Q-FISH). 

В ходе работы были модифицированы методические условия и создано программное обеспечение, позволяющее проводить автоматический анализ количества теломерных повторов на Q-FISH- изображениях метафазных пластинок. Была произведена серия валидационных экспериментов, которые показали, что модифицированная методика и созданная программа корректны в определении длин теломер индивидуальных хромосом. Анализ теломерного профиля выявил достоверное укорочение длины теломер на отдельных плечах индивидуальных хромосом у пациентов с РА в сравнении с донорами.

По нашим предположениям обнаруженные отличия в длине теломер индивидуальных хромосом могут вносить вклад в ускоренное старение клеток иммунной системы и нарушения клеточного гомеостаза при РА.
Работа выполнена при поддержке гранта РНФ № 14-15-00346.