Регистрация / Вход
Прислать материал

Определение длины теломер на отдельных плечах индивидуальных хромосом при ревматоидном артрите

Тема
Определение длины теломер на отдельных плечах индивидуальных хромосом при ревматоидном артрите
Авторы
Барковская М.Ш., Богомолов А.Г., Сизиков А.Э., Рубцов Н.Б., Козлов В.А.
Ключевые слова
длина теломер, количественная флуоресцентная гибридизации in situ (Q-FISH), иммунопатология, ревматоидный артрит
Введение
Длина теломер является важным индикатором пролиферативной истории и потенциала клеток. Уменьшение длины теломер в клетках иммунной системы отражает их раннее старение при заболеваниях аутоиммунной природы и хронических воспалительных заболеваниях. В наших предыдущих работах было показано, что происходит укорочение средней длины теломер в мононуклеарах периферической крови при ревматоидном артрите (РА). Однако теломерные повторы распределены в клетке неоднородно, и показатель длины теломер отличается на разных хромосомах. Предполагается, что такие различия в длине теломер индивидуальных хромосом, называемые теломерным профилем, являются врождённой чертой и могут оказывать влияние на патогенез иммуноопосредованных заболеваний.
Цель
Целью настоящей работы было изучение длины теломер на отдельных плечах индивидуальных хромосом пациентов с РА в сравнении со здоровыми донорами.
Материалы и методы

Работа проводилась на мононуклеарах периферической крови, полученных от пациентов с РА и здоровых доноров. У всех испытуемых бралось информированное медицинское согласие на исследование. Относительное количество теломерных повторов на отдельных плечах индивидуальных хромосом оценивалось методом количественной флуоресцентной гибридизации in situ (Q-FISH). 

Результаты

В ходе работы были модифицированы методические условия и создано программное обеспечение, позволяющее проводить автоматический анализ количества теломерных повторов на Q-FISH- изображениях метафазных пластинок. Была произведена серия валидационных экспериментов, которые показали, что модифицированная методика и созданная программа корректны в определении длин теломер индивидуальных хромосом. Анализ теломерного профиля выявил достоверное укорочение длины теломер на отдельных плечах индивидуальных хромосом у пациентов с РА в сравнении с донорами.

Выводы
По нашим предположениям обнаруженные отличия в длине теломер индивидуальных хромосом могут вносить вклад в ускоренное старение клеток иммунной системы и нарушения клеточного гомеостаза при РА.
Работа выполнена при поддержке гранта РНФ № 14-15-00346.