Регистрация / Вход
Прислать материал

Использование нового метода иммуноблоттинга в серологической диагностике антифосфолипидного синдрома

Тема
Использование нового метода иммуноблоттинга в серологической диагностике антифосфолипидного синдрома
Авторы
Ткаченко О.Ю., Лапин С.В, Шмонин А.А., Соловьева Л.Н., Бондарева Е.А., Сельков С.А., Чепанов С.В.
Ключевые слова
антифосфолипидный синдром, антифосфолипидные антитела, иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг, стандартизация
Введение
Лабораторная диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС) состоит в выявлении антифосфолипидных антител (АФА) методом иммуноферментного анализа (ИФА), а именно в детекции антикардиолипиновых (аКл) антител и антител к бета-2-гликопротеину (aБ2Гп). Хотя серологическая диагностика играет решающую роль в постановке диагноза АФС, использование лабораторных тестов затруднено их недостаточной стандартизацией. Новым подходом к детекции антифосфолипидных антител является использование иммуноблоттинга на основе поливинилиденфторидной (ПВДФ) мембраны.
Цель
Целью нашего исследования является сопоставление классических и новых методов детекции АФА и оценка их диагностической ценности в постановке серологического диагноза АФС.
Материалы и методы

Для уточнения и сравнения ценности разных методов мы сопоставили результаты измерения АФА на ИФА тест-системах разных производителей и наборах реактивов для иммуноблоттинга. Нами была собрана коллекция биоматериала 47 пациентов с некардиоэмболическими ишемическими инсультами, 20 пациентов с рецидивирующими тромбозами глубоких вен нижних конечностей и 50 пациентов с акушерской патологией, а также 30 здоровых доноров. В данных сыворотках были измерены аКла IgG, аКла IgM, аБ2ГП1 методом ИФА с помощью тест-систем фирм Euroimmun и Orgentec Diagnostica (Германия) и методом иммуноблоттинга с помощью тест-систе фирмы Medipan (Германия).

Результаты

На основании измерений АФА различными ИФА тест-системами частота aБ2ГП1 составила 31% для Euroimmun ИФА наборов реактивов, 78% - для Orgentec Diagnostica ИФА тест-систем, аКлIgG - 2% и 30%, аКлIgM - 31% и 54% соответственно. Измерив АФА методом иммуноблоттинга  на тест-системах фирмы Medipan, аБ2ГП1 мы обнаружили у 37%, аКлIgG – у 13 %, аКлIgM – 5,8 % пациентов. Сходимость между 3 коммерческими наборами реактивов  варьирует от 64 до 92 %.

Выводы
Новый метод иммуноблоттинга может быть использован в сочетании с классическими методами серологической диагностики АФС.