Использование нового метода иммуноблоттинга в серологической диагностике антифосфолипидного синдрома

Лабораторная диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС) состоит в выявлении антифосфолипидных антител (АФА) методом иммуноферментного анализа (ИФА), а именно в детекции антикардиолипиновых (аКл) антител и антител к бета-2-гликопротеину (aБ2Гп). Хотя серологическая диагностика играет решающую роль в постановке диагноза АФС, использование лабораторных тестов затруднено их недостаточной стандартизацией. Новым подходом к детекции антифосфолипидных антител является использование иммуноблоттинга на основе поливинилиденфторидной (ПВДФ) мембраны.

Целью нашего исследования является сопоставление классических и новых методов детекции АФА и оценка их диагностической ценности в постановке серологического диагноза АФС.

Для уточнения и сравнения ценности разных методов мы сопоставили результаты измерения АФА на ИФА тест-системах разных производителей и наборах реактивов для иммуноблоттинга. Нами была собрана коллекция биоматериала 47 пациентов с некардиоэмболическими ишемическими инсультами, 20 пациентов с рецидивирующими тромбозами глубоких вен нижних конечностей и 50 пациентов с акушерской патологией, а также 30 здоровых доноров. В данных сыворотках были измерены аКла IgG, аКла IgM, аБ2ГП1 методом ИФА с помощью тест-систем фирм Euroimmun и Orgentec Diagnostica (Германия) и методом иммуноблоттинга с помощью тест-систе фирмы Medipan (Германия).

На основании измерений АФА различными ИФА тест-системами частота aБ2ГП1 составила 31% для Euroimmun ИФА наборов реактивов, 78% - для Orgentec Diagnostica ИФА тест-систем, аКлIgG - 2% и 30%, аКлIgM - 31% и 54% соответственно. Измерив АФА методом иммуноблоттинга  на тест-системах фирмы Medipan, аБ2ГП1 мы обнаружили у 37%, аКлIgG – у 13 %, аКлIgM – 5,8 % пациентов. Сходимость между 3 коммерческими наборами реактивов  варьирует от 64 до 92 %.

Новый метод иммуноблоттинга может быть использован в сочетании с классическими методами серологической диагностики АФС.