Регистрация / Вход
Прислать материал

О получении более воспроизводимых результатов биотестирования на солоноводных рачках Artemia salina

Сведения об участнике
ФИО
Шашкова Татьяна Леонидовна
ФИО (на английском языке)
Shashkova Tatiana
Название организации
Сибирский федеральный университет
Информация о докладе
Вид доклада
Постерный доклад
Секция
Биотестирование в нормировании и токсикологическом контроле
Название доклада
О получении более воспроизводимых результатов биотестирования на солоноводных рачках Artemia salina
Соавторы доклада (ФИО, организация, город, страна)
Григорьев Юрий Сергеевич, Сибирский федеральный университет, Красноярск, Россия
Аннотация
В биотестировании гипергалинных сред наиболее часто используют Artemia salina. И в настоящее время актуальность использования этого метода биотестирования возрастает [1].
Вместе с тем, при работе с этими организмами остается ряд вопросов, связанных с вариабельностью показателей выживаемости и чувствительности к модельному токсиканту, а также с трудоемкостью визуального подсчета выживших науплий.
Не достаточная воспроизводимость результатов, полученных в разных лабораториях, может быть вызвана составом среды, в которой содержатся рачки и проводятся токсикологические эксперименты. В качестве культивационной воды предлагается применять незагрязненные морские воды или искусственные соленые среды. Последние готовятся разными способами. Согласно методике, разработанной в МГУ [2], культивационную воду получают внесением в водопроводную воду NaCl. С другой стороны, в соответствии с ГОСТ Р 53886-2010 [3] для содержания артемий рекомендовано использовать искусственную морскую воду, приготовленную из чистых химических реактивов. И, наконец, среду для рачков делают, растворяя в воде сухие концентраты морских солей.
Использование различных по составу культивационных сред при определении токсичности загрязненных соленых вод может приводить к разным результатам. Причиной этому будет являться не одинаковая биодоступность в них потенциально токсичных соединений вследствие их взаимодействия с компонентами самой среды. Кроме того, при использовании водопроводной воды, состав и качество которой существенно варьирует, также можно получить неоднозначные результаты токсичности тестируемых проб, как было установлено нами в предыдущих исследованиях на дафниях [4]. Проведенные эксперименты с науплиями артемий также показывают, что при использовании среды на водопроводных водах с добавлением NaCl не только варьирует чувствительность рачков к токсиканту, но и снижается их выживаемость в контрольном варианте опыта.
Изучение выживаемости науплиев артемий и их чувствительности к модельному токсиканту (бихромату калия) в культивационной воде различного солевого состава и уровня солености показало, что наиболее оптимальной является среда, приготовленная на дистиллированной воде с добавлением комплекса химических реактивов.
Другим значимым фактором для биотеста с науплиями артемий является соотношение объема тестируемых проб воды и количества рачков. С одной стороны для получения статистически достоверных результатов предпочтительнее использовать большее количество особей, с другой – это может приводить к снижению чувствительности биотеста при работе с малым объемом пробы и осложнять процедуру подсчета выживших особей. С учетом этих особенностей в качестве наиболее приемлемого варианта была выбрана плотность посадки рачков в тестируемые пробы - 10 науплиев на 50 мл. Экспонирование рачков лучше производить в устройствах УЭР-03, в которых благодаря вращению кассеты с пробами обеспечиваются равные условия по аэрации, световому облучению и температуре. Для облегчения визуальной регистрации выживаемости артемий был разработан специальный прибор для подсчета рачков.
Таким образом, проведенные исследования позволили определить условия, при которых можно получать более воспроизводимые результаты в токсикологических экспериментах на рачках артемий. На их основе планируется разработать и аттестовать новую методику биотестирования с более высокими эксплуатационными и метрологическими характеристиками.
Ключевые слова
Artemia, биотестирование
Введение
Не заполнено
Методы и материалы
Не заполнено
Полученные результаты
Не заполнено
Заключение
Не заполнено
Цитируемая литература
1. Приказ Минприроды России от 04.12.2014 N 536 "Об утверждении Критериев отнесения отходов к I - V классам опасности по степени негативного воздействия на окружающую среду"
2. Методика определения токсичности высокоминерализованных поверхностных и сточных вод, почв и отходов по выживаемости солоноватоводных рачков Artemia salina L. ФР 1.1.39.2006.02505
3. ГОСТ Р 53886-2010 (ИСО 14669:1999) Вода. Методы определения токсичности по выживаемости морских ракообразных.
4. Шашкова Т.Л. Выживаемость и трофическая активность Daphnia magna Straus в оперативном экологическом контроле водных сред. Автореф. дисс. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук по спец. экология, Красноярск, 2011.
Благодарности
Не заполнено
Название, авторы, резюме (на английском языке)

About getting the more reproducible results on Artemia salina bioassay

Shashkova T.L., Grigoriev Y.S.

Studies, which have been conducted, have allowed to determine the conditions (the medium¢s salt composition, Artemia¢s concentration, etc.), under which it is possible to obtain more stable results in toxicological experiments on Artemia. Based on the research is planned to develop and certify a new technique for biological testing with higher performance and metrological characteristics