Регистрация / Вход
Прислать материал

14.616.21.0010

Аннотация скачать
Постер скачать
Общие сведения
Номер
14.616.21.0010
Тематическое направление
Науки о жизни
Исполнитель проекта
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии"
Название доклада
Модифицированные липопротеиды: разработка новых диагностических методов
Докладчик
Орехов Александр Николаевич
Тезисы доклада
Цели и задачи исследования
Целью ПНИ является выявление атерогенных модификаций ЛПНП и дефектов антиатерогенной активности ЛПВП на уровне протеома и липидома; поиск новых биомаркеров риска сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) и разработка новых методик диагностики атеросклеротических заболеваний.
Актуальность и новизна исследования
Эпидемиологические и клинические исследования предоставили убедительные доказательства того, что высокое содержание липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) и низкий уровень липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) является основным фактором риска развития сердечно-сосудистых. С другой стороны, понижение уровня ЛПНП и увеличение концентрации ЛПВП (на 10 мг/л) связано с 2-3%-ным снижением риска сердечно-сосудистых заболеваний.
Описание исследования

Установлено, что атерогенность сыворотки определяется неустановленным нелипидным фактором и липопротеидами низкой плотности (ЛПНП). Показано, что прединкубация клеток, культивируемых из непораженной интимы аорты человека, с циркулирующими модифицированными ЛПНП (цмЛПНП), полученными из крови пациентов с коронарным атеросклерозом, приводила к 2-5-кратному накоплению внутриклеточного холестерина. Были получены липопротеиды высокой плотности (ЛПВП) из сыворотки крови практически здоровых лиц и больных ишемической болезнью сердца с документированным атеросклерозом коронарных артерий. Антиатеросклеротическая активность ЛПВП была выявлена у 91% здоровых лиц и у 14% больных ИБС. Полученные результаты свидетельствуют о существенном нарушении функций ЛПНП и ЛПВП у больных с атеросклерозом. Это является основанием для поиска молекулярных причин таких дисфункций. Направленные на разработку диагностических методов экспериментальные исследования выявили, что подфракция цмЛПН, выделенных из крови лиц с бессимптомным каротидным атеросклерозом, обладает способностью вызывать накопление холестерина в культивируемых клетках интимы аорты человека. В качестве первого диагностического метода разработан твердофазный лектин-иммуноферментный метод определения цмЛПНП, который обладает высокой чувствительностью и воспроизводимостью. Метод позволяет точно и надежно измерять концентрацию цмЛПНП в сыворотке крови без предварительного выделения фракции липопротеидов. Проведена модификация метода жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим анализом для анализа ЛПВП. Методики, взятые за основу для запланированного исследования в рамках ПНИ, позволяют достоверно оценивать лишь отдельные классы липидов. В результате проведенных модификаций методики, предназначенных для анализа разных классов липидных молекул, были объединены в одну методику. В итоге данная модифицированная методика позволила выявить одновременно 162 разные липидные молекулы. Установлено, что цмЛПНП отличаются от нативных ЛПНП по углеводному и липидному составу. Исследование физических параметров цмЛПНП выявило их разительные отличия от нативных ЛПНП. Выявлено существенное уменьшение размера модифицированных частиц. Другим резко выраженным изменением физических характеристик цмЛПНП является увеличенный электроотрицательный заряд. Окисленность и окисляемость цмЛПНП существенно выше, чем аналогичные показатели нативных ЛПНП. Полученные результаты позволили разработать методы диагностики атерогенных дислипидемий. Были разработаны и созданы Лабораторная методика оценки содержания циркулирующих модифицированных ЛПНП в крови больных и Лабораторная методика оценки биомаркеров дефектной антиатерогенной активности наночастиц ЛПВП. Было проведено исследовательское испытание Лабораторной методики оценки содержания циркулирующих модифицированных ЛПНП в крови больных. Цель исследовательского испытания: оценить диагностическую значимость (чувствительность, специфичность и точность) лабораторной методики оценки содержания циркулирующих модифицированных ЛПНП в крови больных в сравнении с данным альтернативных методов, рекомендованных действующими нормативами по диагностике сердечно-сосудистых патологий. Установлено, что содержание цмЛПНП в сыворотке крови и уровень липопротеидов низкой плотности в составе циркулирующих иммунных комплексов обеспечивают наилучшие показатели чувствительности и специфичности по сравнению с традиционными липидными маркерами – уровнем общего холестерина и холестерина ЛПНП. Иностранным партнёром, который специализируется в исследовании ЛПВП, проведено исследование роли изменений протеома и липидома в проявлении активности ЛПВП. Выявлены композиционных детерминанты антиатерогенных активностей ЛПВП.

Результаты исследования

Абсолютная новизна полученных результатов и высокий методический уровень международного исследования в сочетании с высокой квалификацией исполнителей позволяют заключить, что выполненный фрагмент работы соответствует мировому уровню или превосходит его. Подтверждением этого являются публикации в ведущих международных научных изданиях, а также доклады, сделанные на международных научных форумах.

Сопоставление с результатами аналогичных работ, определяющими мировой уровень, позволяет утверждать, что уникальность ПНИ заключается в исследовании не одной атерогенной формы модификации липопротеидов, как это делается в других науных коллективах в России и за рубежом, а множественной модификации, затрагивающей много параметров, характеризующих различные свойства липопротеидов. Это является преимуществом ПНИ по сравнению с аналогичными работами.

Практическая значимость исследования
Полученные результаты позволяют разработать диагностические наборы для тонкой диагностики дислипидемий, являющихся основным риском сердечно-сосудистых заболеваний, в основе которых лежит атеросклероз.