Регистрация / Вход
Прислать материал

Роль церулоплазмина в ранней диагностике патологии молочной железы у собак

Сведения об участнике
ФИО
Летуновская Анна Владимировна
Вуз
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»
Тезисы (информация о проекте)
Область наук
Науки о жизни и медицина
Раздел области наук
Фундаментальная медицина и физиология
Тема
Роль церулоплазмина в ранней диагностике патологии молочной железы у собак
Резюме
Работа посвящена исследованию уровня церулоплазмина в сыворотке крови сук, больных раком молочной железы. Определена концентрация белка у 20 собак, 5 из которых были клинически здоровы и использованы как показатель физиологической нормы. Выявлена корреляция между уровнем церулоплазмина и степенью злокачественности опухолевого процесса. Исходя из проанализированных данных, уровень белка повышается при раковых процессах за счет участия в ангиогенезе, указывая на степень злокачественности и распространенность поражения тканей молочной железы. Ввиду особенностей взаимоотношения церулоплазмина и неопластической ткани, может являться предиктором развития рака молочной железы.
Ключевые слова
Церулоплазмин, опухоль, рак молочной железы, собака
Цели и задачи
Цель: изучение корреляции уровня церулоплазмина со степенью злокачественности опухолевых поражений в рамках разработки принципов ранней диагностики онкологических заболеваний молочных желез у сук.
Задачи: определить уровень церулоплазмина в сыворотке крови у собак с различной степенью злокачественности поражений молочных желез, определить уровень церулоплазмина в сыворотке крови у собак без патологий, разработать алгоритм ранней диагностики злокачественных поражений молочных желез у сук.
Введение

Частота встречаемости опухолевых поражений молочных желез занимает второе место после опухолей кожи у собак.

Злокачественные опухоли являются довольно частой причиной гибели ценных служебных, охотничьих собак.

В нашей работе мы попытались найти более дешевый и простой аналог в диагностике опухолевых поражений молочных желез. Данный вид исследования нельзя использовать как самостоятельный метод диагностики патологических процессов, поэтому он входит в комплекс методов постановки диагноза. 

Данный метод исследований исследования может быть рекомендован в качестве сопутствующей диагностики опухолевого процесса молочной железы, а также косвенного определения злокачественности процесса.

Методы и материалы

Работа выполнялась на кафедре акушерства и оперативной хирургии ФГБОУ ВО СПбГАВМ. Ультразвуковое и рентгенологическое обследования осуществляли в городском ветеринарном онкологическом центре ООО «Прайд», (г. Санкт-Петербург). Цитологическое, биохимическое и клиническое исследования крови проводили там же. Гистологические исследования проводили на базе НИИ онкологии имени Петрова Н.Н., пос. Песочный, (г. Санкт-Петербург). Анализ сыворотки крови на содержание церулоплазмина осуществлялся в лаборатории кафедры зоологии РГПУ имени Герцена А.И.. Материалом служили собаки-компаньоны различных пород и одной возрастной группы 7-13 лет, а также их сыворотка. 

Для данной работы был проведен анализ историй болезни 20 собак с патологиями молочных желез. Все животные были здоровы по другим диагностическим критериям. В первую очередь исследовались собаки с поражениями молочных желез (15 сук). Контрольную группу составляли здоровые животные (5 сук). 

Методом исследования концентрации церулоплазмина был выбран электрофорез по Лэммли. 

Образцы сыворотки разделяли электрофоретически согласно стандартному протоколу. Для анализа брали 2 мкл сыворотки. Полученные гели инкубировали в растворе о-дианизидина или в растворе парафенилендиамина 1 час при 37ºС. Уровень активности оценивали денситометрически. Количество тотального белка оценивали после окрашивания тех же гелей в растворе Кумасси.

Описание и обсуждение результатов

В ходе исследования сыворотки методом электрофореза по Лэмми с последующим окрашиванием по Кумасси и ортодианизидином и подсчетом интенсивности окрашивания в пикселях от подопытных животных, получили следующие результаты. Среднее значение содержания уровня церулоплазмина у здоровых животных составило 8516 пикселей. Доброкачественные новообразования и высокодифференцированные формы рака отмечались повышением церулоплазмина в среднем значении, равном 12899 пикселей. Средний уровень церулоплазмина при умеренно дифференцированных новообразованиях – 34600 пикселей. Низкодифференцированные образования характеризовались средним повышением уровня церулоплазмина до 45432 пикселей.

Средние значения результатов исследований (в пикселях) сыворотки крови на содержание церулоплазмина

Группа животных

M±m

Здоровые

8516±921

Доброкачественные

12899±1334

Умеренно дифференцированные

34600±4577

Низкодифференцированные

45432±5350

 

Опухоль в организме способствует развитию оксидативного стресса, сопровождающегося подавлением активности большинства компонентов антиоксидантной системы защиты организма и накоплением продуктов перекисного окисления липидов в крови. Активированные кислородные метаболиты принимают участие в прогрессии опухолевых клеток, поддерживая рост опухоли, ее инвазивность и метастатический потенциал [26]. В многочисленных экспериментальных и клинических работах показано, что развитие злокачественных новообразований приводит к значительным изменениям в липидном составе и интенсивности процессов перекисного окисления липидов в опухоли и на уровне организма в целом. Снижение уровня перекисного окисления липидов по мере возрастания распространенности опухолевого процесса, возможно, связано с увеличением активности компонентов антиоксидантной системы. Окислительный стресс на организменном уровне приводит к возникновению опухоли, в т.ч. рака молочной железы [5].

Также, согласно проведенным нами исследованиям, уровень церулоплазмина меняется в зависимости от состояния молочной железы при раковых процессах за счет его стимуляции ангиогенеза. Стимуляторы ангиогенеза прямого действия, которые индуцируют рост сосудов в не зависимости от взаимодействия их с клетками других типов, делят на митогены, инициирующие пролиферацию эндотелиальных клеток и хемотаксические стимуляторы, которые вызывают направленную миграцию эндотелиоцитов. Кроме специфических стимуляторов роста, в ангиогенезе, участвуют три важных компонента: простогландин Е1, ионы меди и гепарин. Церулоплазмин – естественный переносчик ионов меди в плазме крови –  обладает ангиогенной активностью. Ангиогенная активность церулоплазмина обусловлена присутствием ионов меди, содержащихся в большинстве малых полипептидных цепочек, обладающих свойствами индукторов ангиогенеза в опухолевых тканях [9].

 

 

Используемые источники
1. Владимирова Л.Ю. Возможности использования аутоплазмы в лекарственной терапии больных раком молочной железы. Автореф.дис. канд. мед. наук. – Ростов на Дону, 2005. – 21 с.
2. Волков А.А. Комплексы физиологически активных веществ с ионами меди активных центров церулоплазмина Автореф.дис. канд. хим. наук - Н. Новгород, 2006. – 28 с.
31. Patel B.N., David S. A novel glycosylphosphatidylinositol anchored form of ceruloplasmin is expressed by mammalian astrocytes. // J. Biol. Chem. - 1997. - V. 272. - № 32. - P. 20185 - 20190.
32. Song Y., Levenson C.W. Regulation of ceruloplasmin by retinoic acid in the developing rat. // Int. J. Vitam. Nutr. Res. 1997. - V. 67. - № 31. P. 141-144
33. Withrow S.J., Vail D.M., Small animal clinical oncology – 4th edition – Saunders Elsevier, Canada, 2007. – 864р.
Information about the project
Surname Name
Letunovskaja Anna
Project title
The role of ceruloplasmin in the early diagnosis of breast diseases in dogs
Summary of the project
The work is the study of serum ceruloplasmin in female dogs breast cancer patients. We investigated protein concentrations in 20 female dogs, 5 of which were clinically healthy and were used as an indication of the physiological conditions. There was a correlation between serum ceruloplasmin concentration in patients and the degree of cancer malignancy. Due to obtained data, we can use serum ceruloplasmin level in addition to other methods in order to get a complete view of breast cancer development in patient’s organism. This leads toadequate estimation of possible outcomes and ways of treatment .
Keywords
Ceruloplasmin , tumor, breast cancer, dog