ХРОМОСОМНАЯ НЕСТАБИЛЬНОСТЬ У МЕЛКИХ ГРЫЗУНОВ В ЗОНЕ ВЛИЯНИЯ ПРОМЫШЛЕННЫХ ПРЕДПРИЯТИЙ НИЖНЕГО ТАГИЛА
Задачи:
1. Проанализировать источники информации по основным проблемам спонтанного, радиационного и химического мутагенеза, а также по научным основам оценки мутагенного потенциала среды.
2. Изучить специфику биотопического распределения мелких млекопитающих на урбанизированных территориях, в том числе в Нижнем Тагиле.
3. Оценить уровень хромосомной нестабильности в клетках костного мозга у поле-вой и лесной мыши в ряде районов Нижнего Тагила, расположенных на разном удалении от промышленных предприятий.
4. Сопоставить реакцию генома грызунов с различной экологической специализа-цией на мутагенное воздействие.
Исследование фауны мелких млекопитающих в земельных массивах города в сравнении с окружающей природной средой представляет интерес по нескольким причинам. Во-первых, важно знать основные закономерности последствий воздействия городов на природные сообщества, способствующие ускорению эволюционных процессов в антропогенных экосистемах. Во-вторых, изучение мелких млекопитающих в городской среде представляет и практический интерес: по результатам видового и демографического состава сообществ можно судить о степени нарушенности среды. В-третьих, мелкие грызуны как представители класса млекопитающих близки к человеку по реакции генома на мутагенное воздействие факторов окружающей среды.
При изучении пространственно-биотопического распределения мелких грызунов в Нижнем Тагиле были использованы собственные данные живоотлова грызунов, а также данные других студентов, работающих в данном направлении.
Анализ препаратов хромосом проводился методом световой микроскопии при увеличении в 1600 раз на микроскопе «Ergaval» (Германия). В общей сложности было проанализировано 3138 клеток. У всех грызунов в метафазных клетках костного мозга учитывали структурные нарушения хромосом – хромосомные аберрации, числовые нарушения хромосом – анеуплоидию и полиплоидию и пробелы. В каждой метафазной клетке определяли число хромосом и учитывали наличие структурных перестроек хромосом и пробелов. При подсчете общего числа разрывов на клетку была принята «одноразовая» модель для одиночных и парных фрагментов и «двухразрывная» модель для колец, транслокаций и инверсий.
При учете анеуплоидии особое внимание обращали на регистрацию гиплоидных клеток, т.е. клеток, в которых число хромосом меньше диплоидного. Дело в том, что в некоторых случаях хромосомы могут теряться при приготовлении препаратов, поэтому в качестве гиплоидных учитывались лишь метафазы с идеально округлыми очертаниями и достаточно плотным расположением хромосом. Гиперплоидные клетки, т.е. клетки с числом хромосом, превышающим диплоидное, идентифицируются с достаточной степенью уверенности.
При статистической обработке был использован критерий X2 и критерий Крускала-Уоллиса (H).
1. Изучение видового разнообразия и пространственно-биотопической приуроченности мелких грызунов в Нижнем Тагиле показало, что в качестве модельных видов для проведения эколого-генетического мониторинга состояния окружающей среды с помощью грызунов необходимо использовать гемисинантропные виды – полевую мышь и лесную мышь. Именно эти два представителя рода Apodemus являются доминантами или содоминантами в изученных локалитетах, не избегают промзон, где доля этих видов в отловах составляет не менее 60%.
2. В большинстве изученных локалитетов в Нижнем Тагиле уровни структурных нарушений хромосом у представителей рода Apodemus повышены, по сравнению с контрольными популяциями, что свидетельствует о заметном генотоксическом воздействии факторов окружающей среды в Нижнем Тагиле.
3. Самый высокий уровень структурных и числовых аберраций хромосом обнаружен у полевых мышей, обитающих в Тагилстроевском районе Нижнего Тагила. Среди лесных мышей, повышенный уровень кластогенеза установлен также у обитателей Тагилстроевского района и микрорайона Алтайский. Самые низкие уровни геномной нестабильности выявлены у животных, обитающих на территории п. Северный.
4. Обнаружены межвидовые различия в уровнях структурных аберраций хромосом у полевых и лесных мышей, отловленных в одном локалитете в один хронологический период: Apodemus agrarius характеризуется более высоким уровнем кластогенеза, по сравнению с Apodemus (S.) uralensis. Фоновые значения частот структурных повреждений хромосом у полевых мышей также достоверно выше, чем лесных мышей. Установленная видовая специфика реакции генома полевых и лесных мышей на мутагенное воздействие требует дополнительного детального анализа.
5. Анализ содержания Cu, Zn, Cd и Pb в печени мышевидных грызунов показал, что в условиях совместного обитания вблизи Сухоложского поселка у полевых мышей накопление свинца в 1,7 раз выше, чем у лесных мышей. Возможно, что выявленные межвидовые различия в частотах структурных повреждений хромосом связаны, в том числе, и с видовой спецификой в поступлении и аккумулировании свинца, обладающего выраженным генотоксическим воздействием.
6. На городскую среду (на исследуемой территории) в первую очередь оказывают влияние химические мутагены. Это подтверждается результатами сравнительного анализа типов хромосомных перестроек, среди которых преобладали аберрации хроматидного типа, характерные для химического кластогенеза.
Башенина, Н. В. Экология обыкновенной полевки и некоторые черты ее географи-ческой изменчивости [Текст] / Н. В. Башенина. – М. : изд. МГУ, 1962. – 308 с.
Бочков, Н. П. Анализ типов аберрантных клеток – необходимый элемент биологи-ческой индикации облучения [Текст] / Н. П. Бочков // Мед. радиология – 1993. – №2. – С. 31 – 35.
Бужиевская, Т. И. Вирус-индуцированный мутагенез в клетках млекопитающих [Текст] / Т. И. Бужиевская. – Киев : Наукова Думка, 1984. – 260 с.
Герасименко, О. Г. Фенетическая и фенотипическая структура популяций живот-ных (на примере лесной мыши Apodemus sylvaticus L.) [Текст] : автореф. дисс. …к.б.н. / О. Г. Герасименко. – Екатеринбург : [б. и.], 1984. – 23 с.