Регистрация / Вход
Прислать материал

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КЛЕЕВОЙ ПРОТЕКЦИИ СТЕПЛЕРНОЙ ЛИНИИ ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ РУКАВНОЙ РЕЗЕКЦИИ ЖЕЛУДКА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ НА ЖИВОТНЫХ

Сведения об участнике
ФИО
Степаненко Артем Владимирович
Вуз
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Тезисы (информация о проекте)
Область наук
Науки о жизни и медицина
Раздел области наук
Клиническая медицина и науки о здоровье
Тема
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КЛЕЕВОЙ ПРОТЕКЦИИ СТЕПЛЕРНОЙ ЛИНИИ ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ РУКАВНОЙ РЕЗЕКЦИИ ЖЕЛУДКА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ НА ЖИВОТНЫХ
Резюме
Одним из актуальных вопросов бариатрической хирургии является оценка регенеративных процессов в тканях сформированной желудочной трубки при продольной резекции желудка, а так же их влияние на возникновение несостоятельности линии степлерного шва. Для ответа на данный вопрос разработана и реализована хирургическая модель продольной резекции желудка в хроническом эксперименте на 12 кроликах с последующей оценкой результатов через 7 и 14 дней.
Ключевые слова
Хирургия, бариатрия, продольная резекция желудка, сульфакрилат, ожирение, эксперимент
Цели и задачи
ЦЕЛЬ: разработка и реализация хирургической модели продольной резекции желудка в хроническом эксперименте на кроликах с возможностью проведения последующей морфологической оценки результатов.
ЗАДАЧИ:
- разработать и отработать протокол проведения хирургического вмешательства для моделирования продольной резекции желудка на кроликах, воспроизводящий основные этапы операции;
- отработать этапы операции, важные для последующей морфологической оценки необходимых тканей и органов в соответствии с исходной актуальной клинической задачей - вариантами протекции степлерной линии;
- обеспечить выполнение вмешательства, позволяющее достигать максимальный положительный исход с возможностью забора препаратов через 1-2 недели;
- оптимизировать периоперационный период с учётом особенностей вмешательства;
- осуществить прижизненный забор материала и провести первичную макроскопическую оценку результатов;
- определить гистологические и иммуногистохимические методики, в наибольшей степени иллюстрирующие регенеративные процессы в заданных условиях
Введение

Продольная резекция желудка является наиболее распространённой и, одновременно, эффективной бариатрической процедурой, техника которой известна и отработана. Самое опасное ее осложнение - проксимальная несостоятельность линии степлерных швов. Эта проблема экспериментально исследовалась в аспекте ишемии, морфологии, механических факторов, биохимических процессов, влияния на риск и частоту осложнений различных способов протекции. Но имеется определенный «вакуум» в исследовании регенерации в тканях вновь созданной специфической анатомии и позитивном или наоборот, негативном влиянии на нее разных способов укрытия степлерной линии, в частности, нанесения клея «сульфакрилат». 

Методы и материалы

В основной этап эксперимента были включены 12 кроликов породы "Советская шиншилла", обоих полов - 7 самцов и 5 самок, в возрасте 6-12 месяцев, средней массой 2,88 (±0,62) кг. В ходе операции обязательно соблюдались все условия асептики и антисептики. Для резекции использовался одноразовый линейный сшивающий аппарат, одноразовые стерильные кассеты к сшивающему аппарату длиной 60 мм и высотой скрепки 35 мм (картридж синего цвета). 

 

После забора биоматериал желудка животных помещали в нейтральный 10% формалин, фиксировали 48 часов и далее по стандартной схеме заливали в парафин. Изготовили парафиновые срезы толщиной 4 мкм для классических гистологических методик, позволяющих оценить течение репаративных процессов в послеоперационной ране и окружающих рану тканях желудка. Для иммуногистохимического (ИГХ) окрашивания срезы готовили толщиной 1 мкм.

 

Обзорную микроскопию проводили при окрашивании гематоксилин-эозином.

 

Для оценки результатов проводятся следующие исследования:

- ШИК-реакция

- Окрашивание альциановым синим

- Окрашивание по методам Ван Гизон и Массона-Гольднера

- Импрегнация серебром по методу Фута

- Гистохимическое выявление гиалуроновой кислоты

- Окрашивание толуидиновым синим

- ИГХ идентификации биомаркера пролиферации белка Ki-67

- ИГХ выявление триптазы тучных клеток с помощью антитриптазных мышиных антител

 

Работа проводится на базе НИИ экспериментальной биологии и медицины и одобрена локальным этическим комитетом ВГМУ им. Н Н Бурденко.

Описание и обсуждение результатов

Предоперационный период - прекращение кормления за 12 часов и исключение жидкости за 2 часа до операции. За 15 минут до разреза с целью антибиотикопрофилактики производили внутривенное введение 0,2 г цефтриаксона. 

Для анестезии применялся препарат «Золетил 100» 1мл. в/в. Дополнительно проводилась местная инфильтрационная анестезия кожи по линии разреза 2мл. 2% раствора лидокаина. Интраоперационно вводилось 40 мл. раствора Рингера подкожно. Перед вскрытием брюшины ее дополнительно инфильтрировали 2% раствором лидокаина.

После проведения лапаротомии в рану выводился желудок, визуализировался пищеводно-желудочный переход, по направлению к которому производилось прошивание без калибровки зондом после рекомендуемой экспозиции.

12 кроликов распределены на 3 группы по 4 животных:

  • 1 группа - линия шва покрывалась 0,3 мл клея «сульфакрилат»
  • 2 группа - степлерная линия ушивалась с погружением
  • 3 группа - без дополнительной обработки линии шва

Затем проводилась окончательная оценка линии шва и первичной адгезии, осуществлялся контроль гемостаза. У одного кролика 3 группы потребовалось дополнительное прошивание участка кровотечения степлерной линии. Дренирование брюшной полости не проводилось. Лапаротомная рана ушивалась полипропиленом 3-0 и покрывалась клеем «сульфакрилат».

1-е сутки - употребление жидкости в неограниченном количестве

Со 2 дня - кормление сеном и комбикормом

Антибиотикопрофилактика проводилась 3 дня

Проводился регулярный контроль за состоянием животных с протоколированием.

Повторная лапаротомия с целью макроскопической оценки и забора материала для морфологического исследования с последующим выведением животного из эксперимента проводилось через 7 дней (7 кроликов) и 14 дней (5 кроликов).

 

Основная задача состояла в правильном и быстром прижизненном заборе препарата для микроскопии и ИГХ из зоны интереса с максимальным исключением влияния на ткани внешних факторов с максимально быстрой фиксацией. 

 

Макроскопически: через 7 дней в 1 и 3 группах наблюдалась достаточно схожая картина выраженной воспалительной реакции с наличием экссудации, фибрина, выраженным адгезивным  процессом. Максимальная адгезия - в верхней трети линии с краем печени. Отмечался умеренный отек стенки желудка вокруг линии шва. Налет фибрина был максимально выражен у животных в группе без покрытия. Через 14 дней визуально во всех 3 группах отмечалась схожая макроскопическая картина с лишь немного более выраженными адгезивными процессами в 1 и 3. В целом воспалительный компонент - экссудация, изменения стенки желудка, наличие фибрина было минимальным. 

 

Таким образом, мы считаем, что на данном этапе разработана и реализована успешная хирургическая модель продольной резекции желудка в хроническом эксперименте на кроликах. На текущий момент, в рамках последующих этапов работы проводится морфологическая оценка результатов с помощью выбранных методик.

Используемые источники
1. Акаевский А. И., Ю. Ф. Юдичев, Н. В. Михайлов, И. В. Хрусталева. Анатомия домашних животных. М., Колос. 1984.
2. Жеденов В.Н. Анатомия кролика. М., Советская наука. 1957.
3. В.Т. Марченко и др. Медицинский клей «Сульфакрилат» антибактериальная противовоспалительная клеевая композиция. Руководство для применения в хирургических отраслях. Новосибирск, 2013.
4. В.Т. Марченко, В. А. Шкурупий. Морфологические особенности репаративной регенерации органов и тканей при использовании «Сульфакрилата» нового поколения. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины». 2004.
5. Metabolic/bariatric surgery worldwide report by Dr. Henry Buchwald (Obes Surg. 2013 Apr;23(4):427-36)
6. Bariatric Surgery Worldwide 2013, L.Angrisani (Obes Surg. 2015 Oct;25(10):1822-32)
Information about the project
Surname Name
Stepanenko Artem
Project title
COMPARATIVE EVALUATION OF THE GLUE PROTECTION OF THE STAPLED LINE WHILE MODELING A LONGITUDINAL GASTRECTOMY IN THE LONG-TERM EXPERIMENT ON ANIMALS
Summary of the project
One of the topical issues of bariatric surgery is to assess the regenerative
processes in tissues of the formed gastric tube with a longitudinal resection
of the stomach, as well as their influence on the failure of the line of stapled suture. To answer this question they have developed and implemented a surgical model of
longitudinal resection of the stomach in the long-term experiment on 12 rabbits, followed by the evaluation of the results 7 and 14 days later.
Keywords
Surgery, bariatrics, experiment, obesity, sleeve, gastrectomy, resection, sulfakrilat