Эпизоотология, диагностика и лечебно-профилактические мероприятия при кровепаразитарных заболеваниях животных в Республике Крым

В настоящее время проблема кровепаразитарных заболеваний становится все более актуальной. Среди них особое место уделяют эрлихиозу, на изучение которого направлен проект. Условия Крыма способствуют круглогодичному размножению клещей - переносчиков эрлихий животных и человека, что является причиной постоянных вспышек кровепаразитарных заболеваний на полуострове. Эрлихиоз регистрируется у всех видов животных и человека, вызывает снижение продуктивности животных, а также может привести к гибели. Комплексных исследований по эрлихиозу в Крыму не проводили, что делает работу актуальной и своевременной.

Цель: провести комплексный мониторинг эрлихиоза животных на территории Республики Крым, разработать эффективные диагностические тесты, а также усовершенствовать комплекс лечебно-профилактическихмероприятий с учетом эпизоотологических особенностей заболевания в условиях Крымского полуострова.
Задачи:
1. Установить видовой состав эрлихий в паразитарных системах переносчик-хозяин в Республике Крым;
2. Изучить видовой состав клещей-переносчиков эрлихиоза на территории Крыма;
3. Определить минимальные инвазирующие дозы возбудителя эрлихиоза в организме переносчика - клеща;
4. Изучить возможность трансовариальной передачи эрлихий в популяции клещей;
5. Разработать диагностические тесты для выявления эрлихиоза при различных клинических формах.
Методы к решению данных задач:
1. Выделение и видовая идентификация возбудителя из организма переносчика и хозяина методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР);
2. Определить минимальнуюинвазирующую дозу возбудителя эрлихиоза в организме клеща-переносчикапутем трансмиссивного заражения лабораторных животных;
3. Изучитьклиническоепроявление различных форм эрлихиоза;
4. Выявить возможностьтрансовариальной передачи эрлихий путем определения наличия возбудителя в потомстве клещей;
5. На основании полученных эпизоотологических, клинических, гематологических исследований разработать диагностические тесты эрлихиоза при различных клинических формах.

Решение фундаментальной научной проблемы, на выполнение которой направлен проект,зависит от выполнения ряда задач, в т.ч. комплексного исследования по эрлихиозу животных в Республике Крым. Для определения роли иксодовых клещей в циркуляции эрлихий в природе необходим мониторинг зараженности их паразитами. Изучение распространенности эрлихиоза животных в Крыму, позволит определить эпизоотологические особенности, специфику течения данного заболевания, а также оценить существующие диагностические методы с целью последующей разработки эффективных диагностических тестов для установления эрлихиоза при различных клинических формах. В настоящее время удается диагностировать данное заболевание только в острой форме. 

В основу работы положены результаты исследований, проведенных в период 2014-2016 гг.  Для определения распространения эрлихиоза  среди животных на территории г. Симферополя животных в частных ветеринарных клиниках исследовали собак с клиническими признаками кровепаразитарных заболеваний, без учета породы, возраста и пола. Лабораторный диагноз ставили на основании микроскопии мазков периферической крови, окрашенных по Романовскому-Гимза, а также исследуя сыворотку крови с использованием тестов snap 4dx фирмы IDEXX. Для выявления потенциальных очагов возбудителя заболевания проводили сбор иксодовых клещей по стандартной методике [1], а также напитавшихся самок снимали с животных в 5 административных районах Республики Крым (Симферопольский, Бахчисарайский, Ялтинский, Сакский и Белогорский), расположенных в различных географических зонах Крымского полуострова. Для обнаружения эрлихий в клещах применяли метод световой микроскопии фиксированных окрашенных препаратов содержимого кишечника членистоногих. У голодной особи отрезали задний край тела, после чего, держа клеща вертикально, проводили срезом по поверхности предметного стекла, делая мазки 2,5- 3,0 см. Мазок из слюных железх [3] напитавшихся клещей готовили, путем разрезания хитина по окружности и после удаления спинного хитинового покрова и препарирования слюнных желез, расположенные по бокам в передней части тела клеща. Мазок окрашивали по методике Романовского – Гимза.

 

За период исследования, из 1563 животных, поступивших в клиники г. Симферополь с подозрением на кровепаразитарные заболевания, у 315 собак был диагностирован эрлихиоз. Диагноз на эрлихиоз в клиниках ставится в основном на основании клинических признаков и результатов микроскопии окрашенных мазков крови. У больных собак отмечали неспецифические симптомы заболевания: лихорадка, вялость, анорексия и слабая анемия. Однако эрлихий в мазках обнаруживали лишь в 12% случаев. Из всех обследованных животных с клиническими признаками кровепаразитарного заболевания положительную реакцию при серологической диагностике на эрлихиоз отмечали у 43% собак.  Следует отметить, что не во всех случаях положительная серология совпадала с положительной микроскопией. По нашему мнению, это связано с тем, что тест-системы предназначены для выявления антител только к возбудителю E. canis, Наши данные согласуются с результатами исследований других авторов [2]. Характерно, что эрлихиоз собак в Крыму имеет сезонность и в течение года регистрируется не равномерно. Пик данного заболевания приходится на осенние и весенние месяцы. 

Результатом наших исследований по выявлению природных потенциальных очагов возбудителя на территории Крымского полуострова установлено, доминирующими видами клещей в сборах были R. sanguineus, I. ricinus, D. marginatus. Наибольшую заклещеванность и по численности, и по видовому разнообразию отмечали в горно–лесной зоне Крымского полуострова. Собранные иксодовые клещи (n =1712) были исследованы на наличие возбудителя эрлихиоза при помощи светоой микроскопии. Клещи, а именно I. ricinus, в кишечнике которых выявлены свойственные включения были сняты с собак, обитающих на территории г. Симферополь и г. Севастополь Республики Крым. При исследовании сыворотки крови этих животных на эрлихиоз с использованием тестов snap 4dx установили наличие антител к возбудителям рода Ehrlichia. Однако, при микроскопии идентифицировать паразитов в организме клещей не представляется возможным из-за их полиморфности и неспецифичности внешнего вида. 

Согласно результатам исследований, проведённых представителями ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Крым и городе федерального значения Севастополе», совместно с ФКУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» и Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (г. Москва), у клещей, собранных в Белогорском и Сакском районах, при молекулярно–генетическом тестировании на наличие ДНК/РНК возбудителей гранулоцитарного эрлихиоза человека (ГАЧ) были выявлены положительные пробы [4]. Приведённые данные свидетельствуют о персистировании возбудителей эрлихиоза на территории Республики Крым, что приводит к необходимости определения потенциальных очагов заболевания путём мониторинга переносчиков паразитов – иксодовых клещей. 

1. Беспятова Л. А., Бугмырин С. В. Иксодовые клещи Карелии (распространение, экология, клещевые инфекции). Учебно-методическое пособие. Петрозаводск: Карельский научный центр РАН, 2012. - 100 с.
2. Клинико-лабораторные особенности эрлихиоза у собак/А.Г. Ключников [ и др.]// Ветеринария Кубани. – 2010. - № 4. – С. 24-32.
3. Христиановский, П.И. Рекомендации по выявлению природных очагов пироплазмозов животных/ П. И. Христиановский, И. В. Быстров// Российский паразитологический журнал. – 2009.- №1. – С.109-115.
4. Эпизоотическая ситуация в Крымском федеральном округе по результатам обследования в 2014 году/ А. Ю. Попова [ и др. ]// Проблемы особо опасных инфекций. – 2015. – Вып.2. – С.33-36.

The problem of blood parasite diseases becomes increasingly important presently. Among them a special place is given to ehrlichiosis for the research of which the project is directed. Crimean conditions promote year-round breeding of ticks - carriers of Ehrlichia for animals and humans which is the reason of constant outbreaks blood parasite diseases on the peninsula. Ehrlichiosis is recorded for all species of animals and humans, it causes a decrease of the productivity of animals and also it can cause the death. Complex study of ehrlichiosis have not conducted in Crimea which makes the research relevant and timely.