Регистрация / Вход
Прислать материал

ВЛИЯНИЕ D-АСПАРАГИНА НА ФОРМИРОВАНИЕ ГЛИАЛЬНОГО РУБЦА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ СПИНАЛЬНОМ ИНСУЛЬТЕ

Сведения об участнике
ФИО
Читанава Тамара Вангельевна
Вуз
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации
Тезисы (информация о проекте)
Область наук
Науки о жизни и медицина
Раздел области наук
Клиническая медицина и науки о здоровье
Тема
ВЛИЯНИЕ D-АСПАРАГИНА НА ФОРМИРОВАНИЕ ГЛИАЛЬНОГО РУБЦА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ СПИНАЛЬНОМ ИНСУЛЬТЕ
Резюме
Изучали влияние D-аспарагина на формирование глиального рубца в эксперименте у крыс с моделью спинального инсульта. Крысы разделены на 3 группы: №1 (интактные) – 4 крысы, №2 (сравнения) – 6, которым воспроизводился фокальный фототромбоз кровеносных сосудов грудного отдела спинного мозга, с последующим изъятием участка на 17 сутки; №3 (опытная) – 14 животных со спинальным инсультом, введением D-аспарагина на 3 сутки в течение 7 дней. На микропрепаратах группы №3 видно незначительное кол-во очагов глиоза, не нарушающих ход проводящих путей. Пероральное применение 0,1% р-ра D-аспарагина в период с 3 по 10 сутки приводит к подавлению процессов глиозной трансформации спинного мозга.
Ключевые слова
Фокальный фототромбоз, глиальный рубец, D - аспарагин
Цели и задачи
Изучение влияния D-аспарагина на формирование глиального рубца в эксперименте у крыс с моделью спинального инсульта.
Введение

Клиницистами предпринимались попытки стимулировать процессы регенерации нервной ткани с помощью имплантации в зону перерыва различных экзогенных материалов – фрагментов дегенерирующего периферического нерва, участков вегетативных и спинальных ганглиев. При использовании эффективных стимуляторов регенерации нервной ткани, глиальный рубец на месте очага повреждения спинного мозга формируется быстрее, чем регенерируют аксоны, таким образом, растущие аксоны «упираются» в образованный рубец и реиннервация дистальных от очага повреждения участков не происходит. Выбрав правовращающий изомер аспарагина мы надеемся заблокировать пролиферацию астроцитов, значительно уменьшить выраженность формирующегося глиального рубца.

 

Методы и материалы

Эксперименты проведены на 24 белых нелинейных самцах крыс средней массой – 250 г. Все оперативные вмешательства сопровождались использованием золетил-ксилазинового наркоза. Характеристика групп животных: группа №1 (интактные) – из 4 крыс; группа №2 (сравнения) – из 6, которым воспроизводился фокальный фототромбоз кровеносных сосудов грудного отдела спинного мозга, с последующим изъятием участка спинного мозга на 17 сутки; группа №3 (опытная) – из 14 с последующим введением D-аспарагина на 3-и сутки в течение 7 дней, изъятием участка спинного мозга на 17 сутки. Моделирование спинального инсульта проводилось путем фототромбоза сосудов грудного отдела спинного мозга. В качестве фотосенсибилизатора использован эритрозин в дозировке 50 мг/100 гр. веса тела. Облучение проводилось лазером с длиной волны 514 нм, в течение 30 минут. Выполнялась проводка полученных образцов через изопропанол-минеральное масло, с последующей их заливкой в парафин. Окрашивание микропрепаратов проводилось гематоксиллином - эозином.Фотографии микропрепаратов выполнялись в области проводящих путей спинного мозга, сохранялись в формате bmp. Для анализа фотографий микропрепаратов применялся фоторедактор GIMP2. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием программного обеспечения «Statistica 10 version». Сравнение групп проводилось с использованием  критерия Колмогорова-Смирнова, с уровнtv значимости *p < 0,05.

Описание и обсуждение результатов

Случаев незапланированной гибели и осложнений у животных зарегистрировано не было. При исследовании микропрепаратов продольных срезов спинного мозга, полученных от крыс из группы №1 (интактные), в области прохождения разреза через задние рога отчетливо прослеживаются продольные пучки проводящих путей.

На микропрепаратах продольных срезов спинного мозга, полученных от крыс из группы №2 со спинальным инсультом без применения D-аспарагина прослеживаются явления глиозной трансформации спинного мозга – в области проводящих путей видно множество клеток (предположительно астроцитов) образующих ячеистые структуры – микрокисты, что свидетельствует о формировании глиального рубца в области очага фототромбоза.

На микропрепаратах продольных срезов спинного мозга, полученных от крыс из группы №3 (опытная) прослеживается незначительное количество очагов глиоза, которые, однако, не нарушают хода проводящих путей, видно меньшую плотность клеток глии, а также частично сохраненные аксоны, проходящие сквозь область формирующегося глиального рубца, что является свидетельством эффективности применения D-аспарагина.

При сравнении содержания клеток на микропрепаратах группы №1 и группы №2 со спинальным инсультом без применения D–аспарагина прослеживается троекратное увеличение количества глиоцитов, что свидетельствует об активации глиозной трансформации на месте очага повреждения. Различия в данных группах достоверны с уровнем значимости p<0,001. Сравнивая количество клеток на микропрепаратах от группы №2 со спинальным инсультом без применения D-аспарагина и группы №3 со спинальным инсультом с применением 0,1% раствора D-аспарагина очевиден так же значительный разрыв, свидетельствующий о торможении пролиферации глии на месте очага повреждения, достоверность различий подтверждает уровень значимости p<0,01.

ВЫВОД. Пероральное применение 0,1 % раствора D-аспарагина у крыс с моделью спинального инсульта в период с 3 по 10 сутки от начала эксперимента, при исследовании спинного мозга на 17 сутки приводит к выраженному подавлению процессов глиозной трансформации спинного мозга и тормозит образование глиального рубца, следовательно является перспективным для дальнейшего изучения с целью повышения реабилитационного потенциала у пациентов с повреждением спинного мозга.

Используемые источники
СПИСОК ИССЛЕДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ:
1) Брюховецкий И.С., Дюйзен И.В. Морфохимическая характеристика спинного мозга крыс после торакальной сегментэктомии и трансплантации полимерного коллагенового нейроматрикса «Сферогель – Э»II TM с инкорпорированными обкладочными нейроэпителиальными клетками // Гены и клетки, 2008. №2. С. 57 – 62.
2) Гринь А.А. Профилактика и лечение осложнений у больных с травмой позвоночника и спинного мозга // Сб. науч. Тр. о-ва «Спинной мозг» – М., 2003 – С.2 -8
3) Шеперд Г. Нейробиология: пер. с англ. – М., 1987. – Т.2. – С. 260 – 265.
4) Perna AF, et al. D-aspartate content of erythrocyte membrane proteins is decreased in uremia: implications for the repair of damaged proteins. J Am Soc Nephrol. (1997).


Information about the project
Surname Name
Chitanava Tamara
Project title
The influence of D - asparagine on glial cicatrix formation in experimental spinal stroke in rats.
Summary of the project
We have studied the effect of D - asparagine on the formation of glial scar in rats with spinal stroke model. The simulation was conducted by vascular photothrombosis with the help of laser. Group №1 (intact - 2 rats), group №2 (comparison0 - 3 rats, which reproduce the focal photothrombosis, group №3 (experimental) - 7 rats were feeded by D - asparagine results in lesser severity glial processes transformation.
Keywords
Focal photothrombosis, glial scar, D - asparagine