Регистрация / Вход
Прислать материал

Маркерный метод верификации атрофии слизистой оболочки желудка и предикции рака желудка кишечного типа

Сведения об участнике
ФИО
Забудская Ксения Геннадьевна
Вуз
государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Омский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Тезисы (информация о проекте)
Область наук
Науки о жизни и медицина
Раздел области наук
Клиническая медицина и науки о здоровье
Тема
Маркерный метод верификации атрофии слизистой оболочки желудка и предикции рака желудка кишечного типа
Резюме
Определена необходимость применения и разработана панель маркеров (CDX2 – ядерный фактор транскрипции, ассоциированный с кишечной дифференцировкой; CD10 – мембраносвязанный муцин щеточной каемки и MUC2 – муцин кишечного типа), позволяющая провести высоковалидную детекцию атрофии слизистой оболочки желудка. Представлен прототип системы поддержки принятия решений для верификации «стартовой площадки» рака желудка кишечного типа.
Ключевые слова
атрофический гастрит, рак желудка, биомаркеры, иммуногистохимические маркеры
Цели и задачи
Цель: определение высоковалидного набора белков-маркеров для детекции атрофии слизистой оболочки желудка.
Задачи.
1. Определить алгоритм последовательной иммуногистохимической идентификации перечисленных маркеров.
2. Оценить атрофию слизистой оболочки желудка
Введение

В Российской Федерации рак желудка занимает второе место в структуре онкологической заболеваемости, ежегодно регистрируют 50000 новых случаев рака желудка, большинство на III-IV стадии. Самая частая форма, рак желудка кишечного типа возникает на 4-5-м десятилетиях жизни на фоне длительно протекающего воспаления слизистой оболочки желудка, приводящего к её атрофии. Риски рака желудка: при атрофическом гастрите в 5-6 раз выше, чем в популяции, при эпителиальной неоплазии – прогноз быстрого перехода в рак. Вторичная профилактики основана на технологически сложном мониторинге с целью обеспечения валидности верификации атрофии и эпителиальной неоплазии слизистой оболочки. Основная задача – максимально ранняя диагностика рака желудка.

Методы и материалы

 Для  оценки возможности верификации атрофии слизистой оболочки желудка была подобрана коллекция гастробиоптатов – 250 гистологических препаратов с правильно ориентированными железами. Из них были отобраны препараты с наличием атрофии слизистой оболочки желудка. Это достигалось искусственно заданными условиями отбора: выбраковывался любой гистологический препарат, по поводу которого было сомнение о наличии в нем атрофии слизистой оболочки желудка. Затем из оставшихся 118 образцов методом рандомизации были выбраны 50 блоков. Из этих блоков приготовили серийные срезы, в которых и была проведена детекция маркерных признаков. Аналогичным методом были отобраны 50 образцов слизистой оболочки желудка, залитых в парафин, в которых отсутствовала атрофия слизистой оболочки

В качестве маркеров атрофии были выбраны гистохимические и иммуногистохимические признаки/маркеры, отражающие дефицит желез (гиперплазия гладкомышечных, ретикулярных аргирофильных и эластических волокон), а также изменение клеточного фенотипа (метаплазия кишечная и пилорическая): продукция белка CDX-2 - белка мукоцита, вставшего на путь кишечной дифференцировки, продукция белка Shh - условный признак желудочной дифференцировки эпителия, выработка клетками виллина и CD10 -белки, ассоциированные со щеточной каемкой, а также ШИК-реакция или диамин железа в сочетании с альциановым синим, продукция слизи, содержащей  MUC2 и MUC5AC

Иммуногистохимическое исследование выполняли на парафиновых срезах.

 

Описание и обсуждение результатов

В результате наиболее валидными биомолекулярными маркерами с высокойчувствительностью и специфичностью атрофии слизистой оболочки желудка при хроническом гастрите являются клеточные продукты, отражающие кишечный вариант дифференцировки желудочного эпителия – формирование кишечной метаплазии/метапластической атрофии. К ним можно отнести кишечный фактор транскрипции – белок CDX-2, мембраносвязанный муцин щеточной каемки – CD10 и муцин кишечного типа MUC2.

Иммуногистохимическая детекция трех выделенных высоковалидных биомолекул, отражающих наличие метапластической атрофии, может позволить использовать для диагностики атрофического гастрита материал, полученный не из точек, определенных международными протоколами эндоскопического исследования желудка, при малых объемах ткани, при неправильно залитом фрагменте – на тангенциальных срезах. На основании полученного материала зарегистрирована база данных.

Таким образом панель маркеров даёт возможность выявить базовые графические образы (распознаваемые диагностические паттерны) в исследуемом материалеВыявленная иммуногистохимическая сигнатура сочетания высоковалидных молекулярно-клеточных маркеров атрофии слизистой оболочки желудка при хроническом гастрите может стать субстратом современного предиктивного подхода к вторичной профилактике рака желудка, а также дополнить биопсийный стандарт диагностики.

Дополнительных исследований требует задача обнаружения и исправления дефектов исходного материала. В отношении чего мы и планируем продолжить исследование на тангенциальных срезах, оценить возможности и ограничения метода и пригодность использования в рутинной практике анализа материалов гастробиопсии.

Используемые источники
1. Аруин Л.И. Международная классификация хронического гастрита: что следует принять и что вызывает сомнения / Л.И. Аруин, А.В. Кононов, С.И. Мозговой // Архив патологии. – 2009. – Т.71(4). – С. 11-17.
2. Кононов А.В. Морфогенез атрофии слизистой оболочки желудка как основа фенотипа хронического гастрита / А.В. Кононов, С.И. Мозговой, М.В. Маркелова и соавт. //Архив патологии. – 2011. – Т. 73(3). – С. 26-31
3.Мозговой С.И. Алгоритм определения типа кишечной метаплазии слизистой оболочки желудка с помощью комбинированных гистохимических методов /С.И. Мозговой // Архив патологии. – 2009. – Vol. 73(4). – P. 46-47.
4.Odze and Goldblum surgical pathology of the GI tract, liver, biliary tract, and pancreas/ / [edited by] Robert D. Odze, UnitedVRG, John R. Goldblum. – Elsevier, 2015. —Third edition. – 1612p.

Information about the project
Surname Name
Zabudskaya Ksenya
Project title
Marker method of verification of gastric mucosal atrophy and prediction of intestinal-type gastric cancer
Summary of the project
OBJECTIVE: To define a high-valid set of proteins markers for detection of gastric mucocal atrophy.
SUBJECTS AND METHODS:
50 diagnostic cases morphologically diagnosed with gastric mucosal atrophy were selected for examination. The validity of the histological and immunohistochemical signs/markers reflecting a gland abnormality (hyperplasia of smooth muscle cells and argyrophilic and elastic fibers) and a cell phenotype change (intestinal and pyloric metaplasia): CDX-2, Shh, CD10, MUC2, and MUC5AC was estimated in gastric biopsy specimens with atrophic gastritis forms verified in accordance with international classifications. The validity of the signs/markers was assessed, by calculating the sensitivity, specificity, prognostic value of positive and negative results, and positive and negative likelihood ratios.
RESULTS:
There were 3 molecules: CDX-2 is a nuclear transcription factor associated with intestinal differentiation; CCD10 is a brush border membrane-bound mycin and MUC2 is an intestinal-type mycin, which showed a high validity like the markers of metaplastic atrophic gastritis. An algorithm that could probably evaluate atrophic gastritis was elaborated for the successive immunohistochemical identification of the above-mentioned marker.
CONCLUSION:
The proposed technical decision to verify atrophic gastritis by the biomarker method may be not an alternative, but complementary technique of identifying the form of atrophic gastritis.
Keywords
Atrophic gastritis, (intestinal-type) gastric cancer, immunohistochemical biomarker