Регистрация / Вход
Прислать материал

Конструирование противоопухолевых препаратов селективного действия на основе микробных рибонуклеаз.

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Выполнение этапа проекта
Продолжительность работ
2005 - 2006, 15 мес.
Бюджетные средства
6 млн
Внебюджетные средства
0 млн

разработка принципов конструирования и создание на базе микробных рибонуклеаз высокоселективных противоопухолевых препаратов нового поколения

Соисполнители

Организация
ИМБ РАН

Этапы проекта

1
11.07.2005 - 08.12.2005
В результате работы впервые было создано 40 мутантных конструкций ферментов и отобрано для дальнейших исследований 14 мутантных рибонуклеаз.В качестве показательных выделены пять групп мутантных рибонуклеаз: где знак заряда изменен на противоположный (I), исходный отрицательный заряд частично нейтрализован (II), присоединение положительно заряженных аминокислотных остатков проведено к С-концу молекулы (III), присоединение положительно заряженных аминокислотных остатков проведено к N-концу молекулы (IV), повышена конформационная стабильность молекулы (V).Степень внедрения и эффективность использования полученных конструкций в качестве противоопухолевых препаратов зависит от выполнения следующих этапов работ.
Развернуть
2
01.01.2006 - 30.06.2006
Реферат

Отчет 53 с., 1 ч., 21 рис., 4 табл., 81 источник
МИКРОБНЫЕ РИБОНУКЛЕАЗЫ, ГОМОГЕННЫЕ БЕЛКИ, МУТАНТЫ, ЗАРЯД МОЛЕКУЛЫ, КАТИОННОСТЬ, КОНФОРМАЦИОННАЯ СТАБИЛЬНОСТЬ, ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ, АПОПТОГЕННЫЙ ЭФФЕКТ

Изучены цитотоксические и иммуногенные свойства микробных рибонуклеаз - перспективных терапевтических противоопухолевых препаратов. Исследованы токсические эффекты РНКазы Bacillus intermedius (биназы) и Streptomyces aureofaciens (РНКазы Sa) и их мутантов на клетки бактерий, охарактеризована генотоксическая активность микробных РНКаз и их мутантов в прокариотических тест-системах, исследовано апоптогенное действие биназы и ее мутантов со сниженной каталитической активностью на культуры нормальных и злокачественных клеток крови, а также на клетки солидных опухолей животных, охарактеризованы иммуногенные свойства РНКазы B. intermedius. по анализу специфических активационных маркеров Т-клеток. Установлено, что токсические, генотоксические и апоптогенные эффекты бактериальных РНКаз в основном детерминированы катионными и каталитическими свойствами фермента. Кроме того, получены данные, свидетельствующие об отсутствии иммуногенности биназы. Результаты проведенных исследований позволяют считать катионные каталитически активные бактериальные РНКазы перспективными для создания новых средств щадящей противоопухолевой терапии, альтернативных классическим ДНК-повреждающим агентам, обладающим невысокой селективностью действия.
Развернуть
3
01.07.2006 - 31.10.2006
АННОТАЦИОННЫЙ ОТЧЕТ О НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЕ
Конструирование противоопухолевых препаратов селективного действия на основе
микробных рибонуклеаз
  (заключительный)
ГК 02.434.11.3020


МИКРОБНЫЕ РИБОНУКЛЕАЗЫ, МУТАНТЫ, СТРУКТУРА, КАТИОННОСТЬ ИЗБИРАТЕЛЬНАЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ, МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ

Целью работы явилось получение набора мутантных бактериальных рибонуклеаз, сравнение их физико-химических характеристик и оценка их цитотоксического действия на злокачественные клетки, а также характеристика показателей селективности действия, генотоксичности и иммуногенности ферментов, позволяющих обосновать возможность использования РНКаз как средств щадящей противоопухолевой терапии. Объектом служили микробные рибонуклеазы: биназа (из Bacillus intermedius) и РНКаза Sa (из Streptomyces aureofaciens). На их основе получены мутанты по каталитической активности, величине заряда и характеру распределения заряда в молекуле. Методом рентгеноструктурного анализа высокого разрешения определены пространственные структуры РНКаз SaCG2K2, K2NSa, K2N5NQ, и 5NQ. Охарактеризованы молекулярные свойства РНКаз, важные для противоопухолевой активности, выявлена доминирующая роль заряда молекулы. Показано, что потенциальными мишенями действия РНКаз являются онкоген ras и мембранные кальций-зависимые калиевые каналы hSK4. Цитотоксичные РНКазы могут влиять на экспрессию генов посредством вмешательства в процесс РНК-интерференции. Отобраны перспективные мутанты РНКазы Sa: 7К, 5К и биназа, сопоставимые по активности с американским препаратом Онконаза (торговая марка Alfacell Inc., USA), проходящим III фазу клинических испытаний против мезотелиомы легких.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники" на 2002-2006 годы

Программное мероприятие

1.2 Проблемно-ориентированные поисковые исследования фундаментального характера
Тема
Конструирование противоопухолевых препаратов селективного действия на основе микробных рибонуклеаз
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
6 млн
Количество заявок
3
Тема
Исследование процесса направленной элиминации опухолевых клеток микробными рибонуклеазами и разработка макета тест-набора для определения эффективности подавления рибонуклеазой процесса развития злокачественных новообразований.
Продолжительность работ
2011 - 2012, 22 мес.
Бюджетные средства
15 млн
Количество заявок
1
Тема
Разработка молекулярных методов диагностики злокачественных новообразований и прогностической оценки цитотоксического действия противоопухолевых препаратов.
Продолжительность работ
2011 - 2012, 21 мес.
Бюджетные средства
48 млн
Количество заявок
15
Тема
Доклинические исследования лекарственного средства - антибактериального и противовирусного препарата широкого спектра действия на основе низкомолекулярных искусственных рибонуклеаз.
Продолжительность работ
2011 - 2013, 27 мес.
Бюджетные средства
33 млн
Количество заявок
1
Тема
Создание синтетических регуляторов активности клеточных белков на основе синтетических аналогов нуклеиновых кислот для конструирования биомедицинских препаратов и диагностикумов нового поколения.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
2