Регистрация / Вход
Прислать материал

Внутриклеточные нейтральные протеазы рыб и водных беспозвоночных:кальпаины и протеасомы.

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Выполнение этапа проекта
Проект
02.442.11.7080
Организация
ИБ КарНЦ РАН
Продолжительность работ
2005, 1 мес.
Бюджетные средства
0,36 млн
Внебюджетные средства
0 млн

Информация отсутствует

Этапы проекта

1
27.10.2005 - 25.11.2005
Получены консультации ведущих специалистов в области изучения внутриклеточных протеаз, обсуждены возможные сложности при выделении протеаз из тканей холоднокровных животных и пути их решения. С целью освоения современных методов выделения и изучения свойств ферментов проведено разделение белковых экстрактов тканей млекопитающих методом электрофореза, гель-фильтрации, ионообменной хроматографии и хроматографии гидрофобных взаимодействий, вестерн-блот анализ, иммуноферментный анализ, детекция хемилюминесценции, определена протеолитическая активность по флюорогенному субстрату, компьютерная обработка данных методом денситометрии при помощи анализа изображений с помощью компьютерных программ Image tool. Изучены свойства, активность и состав пула протеасом, выделенных из тканей млекопитающих, показаны изменения пула в раннем постнатальном развитии. Проведены экспериментальные исследования на собственном биологическом материале (рыбы, водные беспозвоночные): модифицированы освоенные методы разделения и идентификации тканевых белков применительно к холоднокровным, проведена очистка кальпаинов и протеасом изучаемых объектов, определена протеолитическая активность в органах и тканях, установлена молекулярная масса гомологов протеаз, их субъединичный состав, проведен ингибиторный анализ.
Полученные навыки позволяют создать экспериментальное рабочее место в лаборатории экологической биохимии Института биологии КарНЦ РАН, необходимое для проведения всех этапов очистки и изучения свойств протеасом из различных объектов. Модифицированы методики, разработанные для млекопитающих, для изучения гомологов внутриклеточных протеаз у холоднокровных, что является необходимым для обучения студентов и аспирантов в группе по изучению протеолитических ферментов лаборатории экологической биохимии Института биологии КарНЦ РАН, основными объектами исследования в которой являются рыбы и водные беспозвоночные. Литературные и собственные экспериментальные данные достаточны для написания методических рекомендаций для практикума студентов-биохимиков биологического факультета Петрозаводского госуниверситета по темам «Выделение и очистка протеаз из экстрактов тканей теплокровных и холоднокровных животных», «Идентификация белков и их фрагментов методом иммуноблоттинга».
Результаты НИР имеют фундаментальное научное значение для развития знаний о свойствах и биологической роли внутриклеточных макромолекул животных, а также практическое значение в мониторинговых исследованиях по изучению биохимического статуса водных организмов при изменении факторов внешней среды. Результаты НИР могут быть использованы для разработки разделов курса «Биохимия» для студентов высших учебных заведений; для разработки специальных учебных курсов «Химия протеолиза», «Экологическая биохимия» для студентов биологических специальностей; для написания учебно-методических пособий, научных статей и монографий по данной тематике.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники" на 2002-2006 годы

Программное мероприятие

1.9 Проведение молодыми учеными научных исследований по приоритетным направлениям науки, высоких технологий и образования
Продолжительность работ
2012 - 2013, 14 мес.
Бюджетные средства
0,98 млн
Организация
ИХКГ СО РАН
профинансировано
Продолжительность работ
2012 - 2013, 13 мес.
Бюджетные средства
0,68 млн
профинансировано
Продолжительность работ
2010 - 2012, 25 мес.
Бюджетные средства
2,85 млн
Организация
ИВНД и НФ РАН
профинансировано
Продолжительность работ
2005, 2 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
профинансировано
Продолжительность работ
2010 - 2011, 12 мес.
Бюджетные средства
0,45 млн
Организация
НИЯУ МИФИ
профинансировано
Тема
Получение новых наноразмерных борсодержащих макробициклических соединений для ингибирования протеазы ВИЧ.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
1
Тема
Создание внутриклеточных белковых биосенсоров нового поколения.
Продолжительность работ
2008 - 2009, 17 мес.
Бюджетные средства
7,8 млн
Количество заявок
2
Тема
Внутриклеточная сигнализация в нормальных, опухолевых и стволовых клетках.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
1
Тема
Разработка методов для молекулярного in vivo имиджинга внутриклеточных процессов.
Продолжительность работ
2011 - 2012, 21 мес.
Бюджетные средства
60 млн
Количество заявок
7
Тема
Разработка метода применения рекомбинантных генетических конструкций, экспрессирующих гены антимикробных пептидов для терапии внутриклеточных инфекций.
Продолжительность работ
2008 - 2009, 17 мес.
Бюджетные средства
20 млн
Количество заявок
2