Регистрация / Вход
Прислать материал

Проведение научных исследований молодыми учеными. Нейропротекторное действие РНК интерференции у SODI трансгенных мышей с моторной невропатией.

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Выполнение этапа проекта
Проект
02.442.11.7319
Продолжительность работ
2006, 8 мес.
Бюджетные средства
0,6 млн
Внебюджетные средства
0 млн

Информация отсутствует

Этапы проекта

1
20.02.2006 - 31.05.2006
В ходе проведенных исследований впервые получены экспериментальные доказательства наличия РНК интерференции (механизма посттранскрипционной блокады эксперссии гена) в аксоне мотонейронов спинного мозга мыши. Установлено, что в аксоне присутствуют компоненты комплекса RISC (RNA-induced silencing complex), обеспечивающего взаимодействие короткой интерферирующей РНК с мРНК-мишенью, с последующей деградацией мРНК. В частности, показано, что в аксоне присутствуют нуклеаза Argonaute2, белок умственной отсталости ломкой X хромосомы, нуклеаза p100 и геликаза Gemin3. При этом обнаружено что компоненты комплекса RISC в присутствии короткой интерферирующей РНК образуют комплексы, отвественные за деградацию мРНК.
Получены приоритетные данные, свидетельствующие о том, что короткая интерферирующая РНК, апплицированная на центральный отрезок перерезанного седалищного нерва может быть интернализована аксонами и ретроградно транспортироваться в перикарион. Установлено, что короткая интерферирующая РНК, комплементарная мРНК нейрональной формы ?–тубулина, локально ингибирует трансляцию белка в аксоплазме путём деградации мРНК ?–тубулина. При этом дефицит локального синтеза ?–тубулина приводит к замедлению аксонного транспорта в мотонейронах спинного мозга.
Полученные в ходе реализации первого этапа проекта экспериментальные данные (1) подтверждают существование внутриаксонного синтеза белка; (2) доказывают наличие механизма регуляции синтеза белка в аксоне путём РНК интерференции и (3) дают основание полагать, что экзогенная короткая интереферирующая РНК, комплементарная мРНК мутированного гена, прекратить синтез аберрантного белка не только в перикариона, но и на уровне нервных отростков.
Развернуть
2
01.06.2006 - 02.10.2006
При изучении механизма РНК интерференции установлено, что в аксоне присутствуют компоненты комплекса RISC (RNA-induced silencing complex), обеспечивающего взаимодействие малой интерферирующей РНК с мРНК-мишенью, с последующей деградацией мРНК. В частности, показано, что в аксоне присутствуют нуклеаза Argonaute2, белок умственной отсталости ломкой X хромосомы, нуклеаза p100 и геликаза Gemin3. При этом обнаружено что компоненты комплекса RISC в присутствии малой интерферирующей РНК образуют комплексы, отвественные за деградацию мРНК.
В результате проведенных экспериментальных и модельных исследований получены приоритетные данные, свидетельствующие о том, что малая интерферирующая РНК, апплицированная на центральный отрезок перерезанного седалищного нерва может быть интернализована аксонами и ретроградно транспортироваться в перикарион. Установлено, что малая интерферирующая РНК, комплементарная мРНК нейрональной формы тубулина, локально ингибирует трансляцию белка в аксоплазме путём деградации мРНК тубулина. При этом дефицит локального синтеза тубулина приводит к замедлению аксонного транспорта в мотонейронах спинного мозга. Учитывая тот факт, что у G93A мышей в аксоне накапливается мутантная мРНК, с которой транслируется аберрантный белок, и на основании полученных нами данных, что siRNA может быть трансфецирована в аксоны и может локально инициировать РНК интерференцию, можно с уверенностью предположить, что экзогенная siRNA, комплементарная мРНК мутированного гена, остановит синтез аберрантного белка SOD1 в аксоне путём деградации мутантной мРНК.
При исследовании роли эстрогенов на выживание мотонейронов показано, что нейропротекторное действие эстрогенов и селективных модуляторов рецепторов эстрогенов на мотонейроны спинного мозга мыши связано с активацией внутриклеточного каскада сосудистого эндотелиального фактора роста. Экзогенный эстрадиол существенно усиливает экспрессию мРНК сосудистого эндотелиального фактора роста, который не только поддерживает выживание нейронов в условиях патологии, в т.ч. и при боковом амиотрофическом склерозе, но и стимулирует васкуляризацию регенерирующей нервной ткани.
Выявлена роль холинацетилтрансферазы в реализации нейротрофического контроля скелетной мышцы. Впервые показано, что атрофия скелетных мышц, развивающаяся в условиях гиподинамии, зависит от характера экспрессии холинацетилтрансферазы в мотонейронах, иннервирующих данные мышцы.
В ходе выполнения Госконтракта получены приоритетные результаты, доказывающие присутствие механизма РНК интерференции в аксонах мотонейронов спинного мозга, и что малая интерферирующая РНК, апплицированная на центральный отрезок перерезанного седалищного нерва может быть интернализована аксонами и ретроградно транспортироваться в перикарион мотонейронов.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники" на 2002-2006 годы

Программное мероприятие

1.9 Проведение молодыми учеными научных исследований по приоритетным направлениям науки, высоких технологий и образования
Продолжительность работ
2005 - 2006, 14 мес.
Бюджетные средства
10 млн
Организация
ИЦиГ СО РАН
профинансировано
Тема
Доклинические исследования лекарственного средства на основе солей органических кислот с диэтиламиноэтанолом, обладающего нейропротекторным действием.
Продолжительность работ
2016 - 2018, 21 мес.
Бюджетные средства
33 млн
Количество заявок
1
Тема
Создание трансгенных растений – биопродуцентов белков медицинского назначения с иммуномодулирующим действием
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
10 млн
Количество заявок
3
Тема
Доклинические исследования лекарственного средства, действующего на основе интерференции РНК, для терапии аллергического ринита
Продолжительность работ
2017 - 2019, 30 мес.
Бюджетные средства
33 млн
Количество заявок
2
Тема
Создание тест-системы для скрининга лекарственных препаратов с нейропротекторной активностью на клеточном и организменном уровне.
Продолжительность работ
2008 - 2009, 17 мес.
Бюджетные средства
7,8 млн
Количество заявок
1
Тема
Доклинические исследования лекарственного средства для терапии вирусного гепатита С на основе интерференции РНК
Продолжительность работ
2015 - 2017, 29 мес.
Бюджетные средства
33 млн
Количество заявок
1