Ингибирование экспрессии гена инсулиноподобного фактора роста IGF I при помощи направленного воздействия на мРНК этого гена ДНКзимам во время проведения стажировки в Лаборатории регуляции и динамики генома (Национальный музей естественной истории, Париж, Франция).

Впервые предложено использовать ДНКзимы 10-23 для направленного расщепления мРНК гена инсулино-подобного фактора роста IGF I. Созданные нами ДНКзимы 10-23 обладают повышенной устойчивостью в биологических средах и способны эффективно расщеплять транскрипт IGF I мРНК (до 90% в условиях близких к физиологическим). Впервые созданы мультикомпонентные ДНКзимы 10-23 для расщепления мРНК гена IGF I, с повышенной каталитической активностью, по сравнению с «обычными» ДНКзимами. При этом эффективное расщепление протяженного фрагмента РНК (90% в условиях близких к физиологическим), обладающего сложной пространственной структурой, мультикомпонентными конструкциями достигается при использовании существенно более низких концентраций каталитически активной компоненты, что позволит избежать наличия высокой клеточной токсичности. В настоящее время проводятся испытания созданных нами ДНКзимных конструкций в раковых клетках линии mAT2 с целью ингибирования экспрессии гена инсулино-подобного фактора роста. С использованием синтезированных флюоресцентных конъюгатов ДНКзима и «хелпера» подобраны оптимальные условия проникновения олигонуклеотидов в клетки. Подобраны условия мониторинга уровня IGF I мРНК в раковых клетках линии mAT2. Для чего было выделено неоходимое количество суммарной клеточной РНК из раковых клеток линии mAT2. Проведена ферментативная реакция обратной транскрипции с целью наработки кДНК для проведения дальнейшего анализа концентрации РНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с участием флюоресцентного красителя «Sybrgreen» на приборе фирмы Stratagene. Подобрана пара праймеров для селективной амплификации фрагмента IGF I кДНК. Выбран референтный ген (ген домашнего хозяйства GUS) с экспрессией аналогичной по уровню экспрессии IGF I.
Согласно полученным результатам прогнозируется подавление экспрессии гена инсулино-подобного фактора роста IGF I созданными ДНКзимными конструкциями как минимум на 50% от общего уровня экспрессии.