Регистрация / Вход
Прислать материал

Ингибирование экспрессии гена инсулиноподобного фактора роста IGF I при помощи направленного воздействия на мРНК этого гена ДНКзимам во время проведения стажировки в Лаборатории регуляции и динамики генома (Национальный музей естественной истории, Париж, Франция).

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Выполнение этапа проекта
Проект
02.444.11.7000
Организация
ИХБФМ СО РАН

Проведение стажировок в зарубежных научно-образовательных центрах

Соисполнители

Этапы проекта

1
05.09.2005 - 05.12.2005
Впервые предложено использовать ДНКзимы 10-23 для направленного расщепления мРНК гена инсулино-подобного фактора роста IGF I. Созданные нами ДНКзимы 10-23 обладают повышенной устойчивостью в биологических средах и способны эффективно расщеплять транскрипт IGF I мРНК (до 90% в условиях близких к физиологическим). Впервые созданы мультикомпонентные ДНКзимы 10-23 для расщепления мРНК гена IGF I, с повышенной каталитической активностью, по сравнению с «обычными» ДНКзимами. При этом эффективное расщепление протяженного фрагмента РНК (90% в условиях близких к физиологическим), обладающего сложной пространственной структурой, мультикомпонентными конструкциями достигается при использовании существенно более низких концентраций каталитически активной компоненты, что позволит избежать наличия высокой клеточной токсичности. В настоящее время проводятся испытания созданных нами ДНКзимных конструкций в раковых клетках линии mAT2 с целью ингибирования экспрессии гена инсулино-подобного фактора роста. С использованием синтезированных флюоресцентных конъюгатов ДНКзима и «хелпера» подобраны оптимальные условия проникновения олигонуклеотидов в клетки. Подобраны условия мониторинга уровня IGF I мРНК в раковых клетках линии mAT2. Для чего было выделено неоходимое количество суммарной клеточной РНК из раковых клеток линии mAT2. Проведена ферментативная реакция обратной транскрипции с целью наработки кДНК для проведения дальнейшего анализа концентрации РНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с участием флюоресцентного красителя «Sybrgreen» на приборе фирмы Stratagene. Подобрана пара праймеров для селективной амплификации фрагмента IGF I кДНК. Выбран референтный ген (ген домашнего хозяйства GUS) с экспрессией аналогичной по уровню экспрессии IGF I.
Согласно полученным результатам прогнозируется подавление экспрессии гена инсулино-подобного фактора роста IGF I созданными ДНКзимными конструкциями как минимум на 50% от общего уровня экспрессии.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники" на 2002-2006 годы

Программное мероприятие

1.11 Развитие системы стажировок молодых ученых и преподавателей в крупных научно-образовательных центрах (включая зарубежные) и участие в конференциях, симпозиумах, семинарах, школах (в том числе за рубежом)
Продолжительность работ
2005, 3 мес.
Бюджетные средства
0,09 млн
Организация
БИН РАН
профинансировано
Продолжительность работ
2005, 2 мес.
Бюджетные средства
0,44 млн
профинансировано
Тема
Научно-методическое и организационное обеспечение комплексной системы отбора, подготовки и презентации перспективных научно-технологических разработок при формировании российской экспозиции на Международном салоне изобретений «Конкурс Лепин» в г. Париже (Франция) в 2005 году.
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
0,5 млн
Количество заявок
3
Тема
Выполнение научно-исследовательских, опытно-конструкторских и технологических работ молодыми учеными и преподавателями во время проведения стажировок в зарубежных научно-образовательных центрах.
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
26,4 млн
Количество заявок
66
Тема
Обеспечение центром коллективного пользования научным оборудованием комплексных исследований надмолекулярной организации, регуляции и функционирования геномов и других клеточных систем.
Продолжительность работ
2008 - 2009, 9 мес.
Бюджетные средства
17,2 млн
Количество заявок
3
Тема
Электромагнитное окружение Земли под воздействием естественных и антропогенных факторов и его роль в функционировании технологических систем.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
1
Тема
Выполнение научно-исследовательских, опытно-конструкторских и технологических работ молодыми учеными и преподавателями во время проведения стажировок в зарубежных научно-образовательных центрах.
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
17,6 млн
Количество заявок
42