Разработка диагностических критериев патологий мужского бесплодия на основе особенностей молекулярных и структурных модификаций инактивированного хроматина сперматозоидов

Был проведен анализ научной литературы
  В процессе работы проведено количественное электронно микроскопическое исследование образцов спермы 83 пациентов Центра планирования семьи и репродукции г. Рязани
  Выделено несколько морфологических типов хроматина по степени его «зрелости».
  Методом электронной микроскопии подробно изучена динамика структурных преобразований хроматина в спермиогенезе мыши.
  Исследован характер позиционирования нуклеосом на сателлитной ДНК мыши.
  Разработана схема выделения нуклеосом из сперматозоидов человека.
.
Также были проведены патентные исследования, подтверждающие патентную чистоту темы и составлен промежуточный отчет.

Подробное изучение структуры хроматина при дифференцировке мужских половых клеток мыши домашней позволило высказать обоснованную гипотезу о том, что появление сперматозоидов с «незрелым» хроматином в эякуляте человека связано с блокированием динамики репрограммирования хроматина на стадии замены гистонов протаминами.
  Полученные экспериментальные данные служат фундаментальной основой для выяснение характера насыщения ДНК нуклеосомами в хроматине нормальных и патологических сперматозоидов человека.

Разработан метод количественной оценки степени компактизации хроматина в сперматозоидах человека. Разработан метод выделения гистонов из сперматозоидов нормальных доноров и инфертильных пациентов. Разработан метод определения степени метилирования ДНК с использованием хромато-масс-спектрометра.

Для определения адресности метилирования ДНК в ходе нормальной дифференцировки сперматозоидов и в патологических сперматозоидах с нарушенной компактизацией ДНК разработан метод определения степени метилирования ДНК с использованием хромато-масс-спектрометра. Проведено исследование полиморфизма генов, экспрессия которых существенна для обеспечения фертильности в норме и при патологиях. Продолжены работы по электронномикроскопическому обследованию инфертильных пациентов, в эякуляте которых найдены сперматозоиды с незрелым хроматином. Показано, что в сперматозоидах с незрелым хроматином частично блокируется дифференцировка, по-видимому, связанная с конечными этапами репрограммирования генома.