Регистрация / Вход
Прислать материал

Разработка комплексного метода «быстрой» трансдукции опухолевых клеток и их прижизненной визуализации с использованием молекулярных зондов на основе гуманизированных генов красных флуоресцирующих белков для доклинического скрининга противоопухолевых препаратов

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.12.2036
Руководитель работ
Савицкий Александр Павлович

Создание метода "быстрой" клеточной трансдукции и на ее основе получение трансдуцированных клеточных линий, экспрессирующих цветные флуоресцентные белки, для высокоэффективного скрининга лекарственных препаратов.

Этапы проекта

1
15.05.2009 - 31.08.2009
Подобраны пробные ленти- и ретровирусные системы для трансдукции опухолевых клеток. Сконструированы векторы pCDH-CMV-MCS и pBMN-Z., содержащие гены TagRFP и KFP с линкерной последовательностью для распознавания каспазой-3. Проведена оценка эффективности экспрессии целевых белков in vitro.
Развернуть
2
01.09.2009 - 07.12.2009
Получены ретро- и лентивектора на основе ретро- и лентивирусных плазмид последнего поколения, содержащие генноинженерные конструкции красных флуоресцентных белков. Разработаны протоколы методик получения панели векторов. Создана панель векторов 3Т3-pLVT-GFP, 3Т3-pLVT- TRK23 на основе лентивирусных и рТ67-рLNCX2-RFP, рТ67-pLEIN(EGFP) и рТ67-pLNCX2-TRK23 на основе ретровирусных систем доставки генетического материала, содержащих генноинженерные конструкции красных белков и субстратов для каспаз. Проведены трансфекции ретро- и лентивекторами упаковочных клеточных линий с последующей селекцией.
Развернуть
3
01.01.2010 - 30.06.2010
Проведена трансдукция полученными векторами опухолевых человеческих клеточных линий. Получены трансфецированные клеточные линии и осуществлена их селекция по следующим критериям: интенсивность флуоресценции и ее стабильность при пассажах. Проведено моделирование и создана модель апоптоза in vitro под действием индукторов апоптоза, его оценка осуществлялась по уровню каспазной активности. Проведен скрининг противоопухолевых лекарственных средств по эффективности апоптоза in vitro. Созданы трансдуцированные опухолевые модели на бестимусных мышах линии nude и проведен мониторинг активности каспаз с визуализацией изображений in vivo.
Развернуть
4
01.07.2010 - 30.09.2010
Получены трансдуцированные опухолевые модели на бестимусных мышах линии nude. Разработан лабораторный технологический регламент создания трансдуцированных опухолевых моделей на бестимусных мышах линии nude. Проведены обобщение и оценка полученных экспериментальных данных. Проведена технико-экономическая оценка рыночного потенциала полученных результатов. Разработан проект технического задания на ОТР. Определена рыночная стоимость объектов интеллектуальной собственности.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2008 - 2009, 17 мес.
Бюджетные средства
7,8 млн
Организация
ИМГ РАН
профинансировано
Тема
Разработка комплексного метода «быстрой» трансдукции опухолевых клеток и их прижизненной визуализации с использованием молекулярных зондов на основе гуманизированных генов красных флуоресцирующих белков для доклинического скрининга противоопухолевых препаратов.
Продолжительность работ
2009 - 2010, 17 мес.
Бюджетные средства
7 млн
Количество заявок
1
Тема
Создание тест-системы для скрининга лекарственных препаратов с нейропротекторной активностью на клеточном и организменном уровне.
Продолжительность работ
2008 - 2009, 17 мес.
Бюджетные средства
7,8 млн
Количество заявок
1
Тема
Разработка экспериментальных методов скрининга лигандов к белкам – мишеням лекарственных препаратов.
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
3 млн
Количество заявок
5
Тема
Доклинические исследования лекарственного средства - химерного Т-клеточного рецептора, предназначенного для лечения опухолей, экспрессирующих раково-эмбриональный антиген
Продолжительность работ
2013 - 2015, 25 мес.
Бюджетные средства
33 млн
Количество заявок
2
Тема
Разработка методов прижизненного мониторинга молекулярных процессов в живых организмах на основе принципов флуоресцентной томографии
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
10 млн
Количество заявок
3