Панель тирозиновых киназ как инструмент для поиска новых ингибиторов и изучения пространственной структуры ингибиторных комплексов

Проведено клонирование 16 генов тирозин-киназ; создана бакуловирусная система экспрессии в клетках насекомых. Осуществлена наработка биомассы; разработаны протоколы выделения тирозин-киназ. Проведена препаративная наработка и оценка биохимических свойств киназных мишеней. Разработаны протоколы биохимического анализа киназной активности; проведён биохимический скрининг библиотек химических соединений в формате плашечного киназного теста.

Проведён подбор условий для получения кристаллов, пригодных для рентгеноструктурного эксперимента и предварительный анализ качества полученных кристаллов. Проведено определение коэффициентов ингибирования и специфичности 23-х найденных соединений.

Проведена кристаллизация комплексов тирозин-киназ с ингибиторами и предварительный анализ качества полученных кристаллов.
Получены данные рентгеноструктурного анализа для тирозин-киназ и их комплексов с ингибиторами.
Проведено решение и уточнение пространственных структур с использованием специализированного программного обеспечения.
Проведена экспертиза качества полученных пространственных структур.

Проведёны анализы полученных пространственных структур и определение ключевых элементов в химической структуре ингибиторов, ответственных за их связывание с активными центрами тирозин-киназ
Проведена оценка возможности создания конкурентоспособной продукции на основе полученных структур тирозин-киназ и их комплексов с ингибиторами.
Проведена оценка технико-экономического рыночного потенциала полученных результатов.
Разработаны рекомендации по использованию результатов проведенной НИР.
Разработано ТЗ на ОКР(ОТР).