Создание системы селективной доставки антимитотических терапевтических агентов к опухолевым тканям

Синтезированы липофильные формы биодеградируемых производных 4-арилкумаринов – 4-[3-гидрокси-4-метоксифенил]кумарина и 4-[3-гидрокси-4-метоксифенил]-5,7-диметоксикумарина, содержащих в арильном фрагменте, находящемся в положении «4» кумаринового скелета остаток жирной кислоты (олеиновой, пальмитиновой или миристиновой). Созданы липосомы, содержащие липофильные формы 4-арилкумаринов. Проведенные предварительные испытания полученных лекарственных липосом на клетках рака молочных желез человека HBL100 показали, что предложенные нами терапевтические липосомы имеют патентоспособный уровень противоопухолевого действия.
С хорошими – высокими выходами синтезирован ряд новых полиалкокси- и/или гидроксизамещенных 4-гидрокси-3-арилкумаринов и 6H,11H-[2]бензопирано-[4,3-c][1]бензопиран-11-онам (21 соединение) Показано, что два соединения демонстрирует хорошую цитотоксическую активность по отношению к клеточным линиям рака молочных желез человека HBL100.
Синтезирован ряд новых 4-гетерилкумаринов, содержащих в качестве гетерильной группы замещенные хинолиновые, тиофенильные, пиридиниевые, пиримидиниевые и индольные фрагменты (~ 20 соединений). Показано, что два соединения, принадлежащие к этому ряду производных демонстрируют очень хорошую цитотоксичность по отношению к клеткам рака молочных желез человека HBL100.

Целью работы является создание системы для селективного транспорта противоопухолевых препаратов к опухолевым клеткам, состоящей из наноразмерных комплексов (100-150 нм) липосомной формы липидного производного антимитотического агента (комбретастатины и их современные 4-арилкумариновые аналоги) и специфического углеводного лиганда – молекулярного адреса – обладающего сродством к эндотелиальным клеткам опухолевых тканей.
Предлагаемый подход позволит:
а) увеличить селективность доставки препарата к опухолевым тканям, минимизировать потери лекарства в кровотоке, а, следовательно, и системную токсичность терапевтического агента (токсичность для здоровых тканей и органов);
б) преодолеть эффект множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток;
в) создать новое поколение противоопухолевых препаратов, превосходящее по фармакокинетическим параметрам известные к настоящему времени аналоги.
В результате выполнения проекта на этапе № 2:
Получены липосомы на основе природных фосфолипидов с липофильными производными комбретастатина А4. Показано, что концентрация активного компонента в лекарственных липосомах составляет 7% мольн. Испытания цитотоксической активности в культуре клеток рака молочных желез человека HBL100 показали, что предложенные нами терапевтические липосомы имеют патентоспособный уровень противоопухолевого действия.
Проведено конструирование адресных липосомных препаратов для системного введения животным на основе олеоильных производных 4-(3’-гидрокси-4’метоксифенил)-2Н-1-бензопиран-2-она и комбретастатина А-4, показавших оптимальные параметры встраивания в липосомы и цитотоксической активности in vitro в ходе выполнения 1 этапа проекта; концентрации активных компонентов в лекарственных липосомах составляют 7% мольн.
Подготовлены экспериментальные животные для проведения первой серии испытаний (мыши линий C57BL/6 и CBRB).
Мышам линии CBRB была проведена трансплантация клеток рака молочных желез путем подкожной инокуляции. Проведены испытания противоопухолевой и антиметастатической активности липосомных препаратов на основе олеоата 4-(3’-гидрокси-4’метоксифенил)-2Н-1-бензопиран-2-она. Оценивали параметры замедления средней скорости роста опухоли и увеличения средней продолжительности жизни. Средняя продолжительность жизни животных с перевитым раком молочных желез – 7-8 недель. Показано, что 4-(3’-гидрокси-4’метоксифенил)-2Н-1-бензопиран-2-она обладает умеренным противоопухолевым эффектом и увеличивает среднюю продолжительность жизни примерно на 10%. Липосомные препараты на основе олеоильного производного 4-(3’-гидрокси-4’метоксифенил)-2Н-1-бензопиран-2-она продемонстрировали увеличение средней продолжительности жизни минимум на 15%. В отличие от интактного 4-(3’-гидрокси-4’метоксифенил)-2Н-1-бензопиран-2-она, показано непосредственное влияние липосомных препаратов на торможение скорости роста опухоли, причем в случае адресных лекарственных липосом с сиалил-Lewis X эффект уничтожения опухоли выражен особенно сильно. Таким образом, первая серия испытаний показала перспективность исследованных препаратов и необходимость проведения дальнейших экспериментов in vivo для подбора оптимальных доз и режимов введения полученных липосом.
Подготовлена следующая группа экспериментальных животных – мыши линии C57BL/6. В настоящее время проводится вторая серия экспериментов с липосомными препаратами на основе олеоильных производных 4-(3’-гидрокси-4’метоксифенил)-2Н-1-бензопиран-2-она и комбретастатина А-4, которая необходима для получения достоверных статистических данных испытаний противоопухолевой и антиметастатической активности при выбранной дозе и режиму введения.