Разработка новейших ветеринарных технологий, направленных на получение организмов-продуцентов, обеспечивающих синтез белков-иммуномодуляторов с целью профилактики и лечения заболеваний, и создание молекулярных методов диагностики наследственных болезней животных и человека

1.1 Анализ научно-технической литературы, нормативно-технической документации и других материалов, по теме проекта.
1.2 Выбор и обоснование принятого направления исследований и способов решения поставленных задач.
1.3 Сопоставление ожидаемых научных результатов с отечественным и мировым уровнем исследований

2.1 Разработка методики экспериментальных исследований, подготовка и создание моделей
2.2 Подбор материала для исследований
- анализ внутривидовой изменчивости и выбор родительских форм
2.3 Проведение исследований, обработка данных.
- дизайн векторов экспрессии и создание штаммов для трансформации;
- разработка методических подходов для выявления агрегатов дрожжевых прионизующих белков;
2.4 . Проведение патентных исследований
2.5 Сопоставление результатов экспериментов с ожидаемыми результатами;
2.6 Характеристика штаммов Pichia pastoris, полученных из Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ);
2.7. Конструирование и синтез праймеров для сайт-специфичного мутагенеза в генах наследственных болезней сельско-хозяйственных животных.

3.1 Проведение исследований, обработка данных.
- изучение экспрессии гена АОХ1 дрожжей Pichia pastoris;
- проведение трансформации дрожжей и растений геном бычьего гамма-интерферона;
- синтез контрольной ДНК для проведения ПЦР с праймерами к мутантным аллелям;
- характеристика новых плейотропных эффектов в генах SUP45 и SUP35 дрожжей Saccharomyces cerevisiae; анализ агрегации амилоидных белков млекопитающих (PrP и Aβ) и гибридных белков, содержащих эти последовательности.
3.2 Сопоставление результатов экспериментов с ожидаемыми результатами

4.1. Проведение исследований, обработка данных.
- изучение экспрессии и наследования гена бычьего гамма-интерферона у модельных объектов;
- изучение содержания белка бычьего гамма-интерферона в модельных объектах с целью отбора высокопродуктивных линий-продуцентов;
- дизайн последовательностей праймеров и зондов для аллель-специфичных вариантов ПЦР в реальном времени;
- скрининг банка генов для идентификации генов с различным эффектом на прионизацию (усиление или ослабление эффекта); анализ изолированных конструкций; изучение характера агрегации белка Sfp1;
4.2 Сопоставление результатов экспериментов с ожидаемыми результатами
4.3 Масштабирование культивирования штаммов дрожжей – продуцентов рекомбинантного белка;
4.4 Тестирование биологической активности рекомбинантного белка гамма-интерферона на лабораторных животных

5.1 Обобщение результатов предыдущих этапов работ. Оценка полноты решения задач и эффективности полученных результатов в сравнении с современным научно-техническим уровнем..
5.2 Создание тест-систем для экспресс-ДНК-диагностики наследственных болезней сельскохозяйственных животных.
5.3 Разработка модели для изучения молекулярных механизмов нейродегенеративных заболеваний человека и животных.
5.4 Проведение дополнительных исследований.
5.5 Оценка возможности создания конкурентоспособной продукции и услуг и разработка рекомендаций по использованию результатов проведенных НИР, включая предложения по коммерциализации.
5.6 Проведение технико-экономической оценки полученных результатов.
5.7 Разработка программы внедрения результатов НИР в образовательный процесс.
5.9 Тестирование биологической активности рекомбинантного белка на культуре клеток и сельскохозяйственных животных.