Регистрация / Вход
Прислать материал

Ферменты для молекулярной биологии и генной инженерии.

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Выполнение этапа проекта
Продолжительность работ
2005 - 2006, 19 мес.
Бюджетные средства
10 млн
Внебюджетные средства
0 млн

Получение новых ферментов с улучшенными свойствами для целей амплификации и модификации нуклеиновых кислот и масштабирование процессов их получения.

Этапы проекта

1
05.05.2005 - 30.09.2005
2
01.10.2005 - 09.12.2005
Jптимизирован комплекс белков, включающих M-MLV ревертазу, ингибитор РНКаз из плаценты и термостабильную ДНК полимеразу со встроенным “горячим стартом” с целью разработки системы, обеспечивающей проведение реакций обратной транскрипции РНК и ПЦР в одной пробирке (ОТ-ПЦР). С использованием этой системы были разработаны диагностические тест-системы для тестирования РНК вирусов животных и растений. Показана возможность использования данной системы ОТ-ПЦР для оценки количества копий РНК в исследуемых препаратах с использованием методики проведения ПЦР в реальном времени с флуоресцентными олигонуклеотидными зондами.
Была проведена оптимизация комплекса белков, включающих урацил-ДНК-гликозилазу (УДГ) и термостабильную ДНК полимеразу со встроенным горячим стартом, с целью разработки антиконтаминационной системы проведения ПЦР.
Разработана технология препаративного производства ДНК-полимераз, полученных на первом этапе проекта; оптимизированы условия максимально эффективной работы ДНК-полимераз; разработана система, обеспечивающая проведение реакций обратной транскрипции РНК и ПЦР в одной пробирке; разработана деконтаминационная система, обеспечивающая эффективную работу урацил-ДНК-гликозилазы и ДНК-полимеразы при проведении ПЦР в одной пробирке.
Развернуть
3
01.01.2006 - 30.06.2006
В результате выполнения третьего этапа проекта получены специфические рекомбинантные scFv антитела к Taq-полимеразе, изучены ингибирующие свойства антител, создан препарат со встроенным горячим стартом, состоящий из рекомбинантного антитела и Taq-полимеразы. Получен препарат модифицированной Thermus thermophilus ДНК полимеразы/ревертазы, отработаны условия, обеспечивающие эффективное проведение реакций обратной транскрипции РНК и ПЦР в одной пробирке. Получена химерная M-MLV ревертаза с ДНК-РНКсвязывающим доменом и отработаны условия получения протяжённых копий к-ДНК. Созданы химерные 5’-3’-экзонуклеазы из Thermus aquaticus, Pyrococcus furiosus, Thermotoga neapolitanа с термостабильными неспецифическими дс-ДНК-связывающими доменами из Thermus aquaticus и Sulfolobus solfataricus, изучены возможности использования модифицированных 5’-3’-экзонуклеаз для оптимизации ПЦР в реальном времени. Разработаны схемы очистки препаратов модифицированных ферментов нуклеотидного обмена и проведена сравнительная характеристика полученных ферментов и их исходных аналогов.
Развернуть
4
01.07.2006 - 09.12.2006
Разработана технологии препаративного получения и производства опытных партий ревертаз и 5’-3’-экзонуклеаз, полученных в процессе выполнения проекта. Проведение лабораторных испытаний полученных ферментов с улучшенными свойствами и комплексных систем. Сопоставлены свойств новых ферментов и комплексных систем на их основе с параметрами ферментов и систем, использующихся в практике.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники" на 2002-2006 годы

Программное мероприятие

1.3 Прикладные разработки в рамках системы приоритетных направлений
Продолжительность работ
2011, 9 мес.
Бюджетные средства
2,6 млн
профинансировано
Тема
Ферменты для молекулярной биологии и генетической инженерии
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
10 млн
Количество заявок
5
Тема
Создание новых ферментов для модификации и синтеза антибиотиков методами белковой инженерии.
Продолжительность работ
2011 - 2012, 14 мес.
Бюджетные средства
32 млн
Количество заявок
6
Тема
Разработка новых методов изотермической амплификации нуклеиновых кислот в реальном времени и их использование в фундаментальных и прикладных исследованиях.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
1
Тема
Ферменты в реакциях тонкого органического синтеза
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
10 млн
Количество заявок
3
Тема
Рациональный дизайн промышленных ферментов, основанный на методах молекулярного моделирования
Продолжительность работ
2008 - 2011, 39 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
2