Регистрация / Вход
Прислать материал

Разработка неинвазивной диагностики пола плода на основе циркулирующих нуклеиновых кислот материнской крови во время проведения стажировки в Институте химической биологии и фундаментальной медицины ННЦ СО РАН.

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Выполнение этапа проекта
Проект
02.444.11.7145
Организация
Томский НИМЦ

Проведение стажировок молодыми учеными и преподавателями в российских научно-образовательных центрах.

Соисполнители

Организация
ИХБФМ СО РАН

Этапы проекта

1
27.10.2005 - 25.11.2005
АННОТАЦИОННЫЙ ОТЧЕТ
о научно-исследовательской работе
«РАЗРАБОТКА НЕИНВАЗИВНОЙ ДИАГНОСТИКИ ПОЛА ПЛОДА НА ОСНОВЕ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ МАТЕРИНСКОЙ КРОВИ»
РИ – 111.0/003/096
Государственный контракт от «26» октября 2005 г. № 02.444.11.7145.
в рамках ФЦНТП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям
развития науки и техники» на 2002-2006 годы»

Цель настоящей работы заключалась в повышении уровня научной подготовки стажера.
В качестве задач исследования определены следующие:
1. Изучить современное состояние научных исследований в изучаемой области.
2. Освоить теоретические и практические основы метода ПЦР в реальном времени.
3. Провести ПЦР-анализ последовательностей ДНК плода (SRY) в крови матери (свободно циркулирующих и связанных с клеточной поверхностью).
Основные результаты, полученные в ходе выполнения настоящего исследования следующие:
Внеклеточные нуклеиновые кислоты присутствуют в крови здоровых людей в малых количествах. По данным большинства авторов, концентрация внеклеточной ДНК в плазме не превышает 20-30 нг/мл. Поэтому для успешной детекции внеклеточных нуклеиновых кислот необходимы как особые методы выделения ДНК, обеспечивающие количественный выход нуклеиновой кислоты, так и чувствительные методы выявления последовательностей ДНК. На сегодняшний день, пожалуй, самым чувствительным и высокоспецифичным методом является ПЦР в реальном времени с различными типами флюоресцентных зондов, позволяющий определить даже 1 копию исследуемого локуса. Данный метод подходит и для выявления ДНК, плода, циркулирующей в крови матери в малых количествах (3-6% от общей фракции внеклеточной ДНК матери в I и III триместрах беременности, соответственно). ПЦР в реальном времени может быть использована, в том числе, и для количественной оценки фетальной ДНК в крови матери, так как известно, что концентрация внеклеточной ДНК плода повышается при патологиях беременности, таких как преэклампсия, преждевременные роды и др., а также в случаях вынашивания плодов с синдромом Дауна. Во время проведения стажировки был освоен метод ПЦР в реальном времени с TaqMan зондами, который в дальнейшем будет применяться для количественной оценки фетальной и материнской внеклеточной ДНК в плазме матери и в элюатах с поверхности клеток материнской крови при нормальной беременности и нарушениях развития плода различной степени тяжести.
Также были проведены эксперименты по выявлению пола плода посредством амплификации локуса SRY плода в материнской крови. Показано, что использование внеклеточной ДНК, связанной с поверхностью клеток матери, в качестве источника генетического материала плода повышает эффективность диагностики пола плода на 11%.
Также в процессе стажировки повышена теоретическая подготовка стажера, в частности, была получена информация о современном состоянии проблемы в мире, получена консультация о методических особенностях работы с внеклеточными нуклеиновыми кислотами, завершена работа над обзорной статьей. В целом благодаря стажировке степень готовности диссертационной работы «Исследование материнской и фетальной внеклеточной ДНК в норме и при нарушениях развития плода» достигла 70%.
Результаты проведенной работы соответствуют задачам, сформулированным в Техническом задании. Уровень полученных первых результатов соответствует современному состоянию исследований по изучению внеклеточной фетальной ДНК в материнской крови.
Полученные результаты могут послужить основой для разработки новых методов неинвазивной пренатальной диагностики различных состояний плода, в том числе его пола.



Руководитель работы
аспирант лаборатории цитогенетики _________________ А.Г. Токарева
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники" на 2002-2006 годы

Программное мероприятие

1.11 Развитие системы стажировок молодых ученых и преподавателей в крупных научно-образовательных центрах (включая зарубежные) и участие в конференциях, симпозиумах, семинарах, школах (в том числе за рубежом)
Тема
Разработка серии приборных комплексов (капилляроскопов и спектрокапилляроскопа) для неинвазивной диагностики параметров циркулирующей крови.
Продолжительность работ
2008 - 2010, 26 мес.
Бюджетные средства
100 млн
Количество заявок
1
Тема
«Организационно-техническое обеспечение проведения всероссийской молодежной конференции «Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине»».
Продолжительность работ
2012, 6 мес.
Бюджетные средства
0,7 млн
Количество заявок
3
Тема
Поддержка научных исследований, проводимых коллективами под руководством приглашенных исследователей по научному направлению «Биология, медицина» в следующих областях: • Общая биология и генетика • Физико-химическая молекулярная и клеточная биология • Фундаментальная медицина и физиология
Продолжительность работ
2012 - 2013, 11 мес.
Бюджетные средства
10,5 млн
Количество заявок
11
Тема
Проведение научных исследований молодыми учеными - кандидатами наук по следующим областям: - общая биология и генетика; - физико-химическая молекулярная и клеточная биология; - фундаментальная медицина и физиология
Продолжительность работ
2010 - 2012, 26 мес.
Бюджетные средства
0 млн
Количество заявок
32
Тема
Проведение научных исследований молодыми кандидатами наук в следующих областях: - общая биология и генетика; - физико-химическая молекулярная и клеточная биология; - фундаментальная медицина и физиология
Продолжительность работ
2011 - 2013, 29 мес.
Бюджетные средства
0 млн
Количество заявок
67