Регистрация / Вход
Прислать материал

"Рецепция и внутриклеточная сигнализация"

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Выполнение этапа проекта
Проект
02.445.11.7067

«Развитие системы ведущих научных школ как среды генерации знаний и подготовки научно-педагогических кадров высшей квалификации»

Этапы проекта

1
05.09.2005 - 04.11.2005
Цель проекта заключалась в исследовании роли урокиназы и Т-кадгерина в механизме ангиогенеза и разработке методологии их применения в клинике сердечно-сосудистых заболеваний на основе генно-клеточных технологий.
Исследование влияния урокиназы и Т-кадгерина на миграцию, адгезию и дифференцировку клеток сосудистой стенки и постнатальных клеток-предшественников проведено с применением современных комплексных методических подходов, используемых для анализа молекулярно-клеточных реакций in vitro и in vivo. Фенотип клеточных культур установлен с помощью морфологического анализа в сочетании с окрашиванием клеток флюорохром-мечеными антителами. Миграционную активность клеток оценивали с помощью микрокамеры Бойдена. Подавление экспрессии Т-кадгерина проводили с помощью трансфекции клеток малыми РНК для получения эффекта РНК-интерференции. Гиперэкспрессии Т-кадгерина достигали с помощью трансфекции клеток генетическими конструктами, несущими кДНК Т-кадгерина человека. Оценку экспрессии исследуемых белков проводили с помощью современных методов электрофореза в SDS-полиакриламидном геле и иммуноблоттинга с применением ECL-метода визуализации. Уровень транскрипции оценивали с помощью качественной полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой (RT-PCR) и количественной RT-PCR в реальном времени.
В результате проведения НИР показано, что урокиназа стимулирует образование свободных радикалов кислорода в культивируемых ГМК посредством активации экспрессии NAD(P)H-оксидаз. Установлено, что гиперэкспрессия урокиназы в ишемизированной ткани стимулирует образование в ней кровеносных сосудов. Отработан метод локальной гиперэкспрессии Т-кадгерина в матригеле, который будет использован для изучения влияния Т-кадгерина на рост кровеносных сосудов. Выделены и охарактеризованы стромальные клетки из жировой ткани. Проведен подбор оптимальных условий выделения и культивирования этих клеток. Кроме того, отработан метод трансфекции стромальных клеток жировой ткани генетическими конструкциями и проанализирована длительность экспрессии трансгена этими клетками после введения в ткань.
Препарат на основе плазмидной ДНК, несущей кДНК урокиназы проходит токсикологическое и аллергологическое тестирования для представления рекомендаций по проведению клинических исследований возможности применения урокиназы для восстановления кровотока в ишемизированных тканях.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники" на 2002-2006 годы

Программное мероприятие

1.12 Развитие системы ведущих научных школ как среды генерации знаний и подготовки научно-педагогических кадров высшей квалификации
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Организация
ИНЦ РАН
профинансировано
Тема
Внутриклеточная сигнализация в нормальных, опухолевых и стволовых клетках.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
1
Тема
Развитие системы ведущих научных школ как среды генерации знаний и подготовки научно-педагогических кадров высшей квалификации. Проведение научно-исследовательских работ по приоритетным направлениям Программы
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
300 млн
Количество заявок
753
Тема
Выполнение научно-исследовательских работ по приоритетным направлениям Программы и поисковых исследований фундаментального характера молодыми учеными и преподавателями, проходящими стажировку в крупном российском научном (научно-образовательном) центре.
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
25 млн
Количество заявок
27
Тема
Научно-организационное, методическое и техническое обеспечение создания международного научно-образовательного центра в области проектирования микро- и наносистем.
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
22 млн
Количество заявок
2
Тема
Совершенствование нормативного и методического обеспечения государственной политики в сфере подготовки и аттестации научных и научно-педагогических кадров в соответствии с приоритетными направлениями развития инновационной экономики.
Продолжительность работ
2011, 2 мес.
Бюджетные средства
3 млн
Количество заявок
1