Создание тест-систем для высокоэффективной диагностики гепатитов В и С методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Стадии проекта

Предложение принято

Конкурс завершен

Проект закончен

Проект

02.512.11.2097

Организация

ИХБФМ СО РАН

Руководитель работ

Власов Валентин Викторович

Продолжительность работ

2007 - 2008, 18 мес.

Бюджетные средства

17,6 млн

Внебюджетные средства

6,6 млн

Конкурс

Работы по проведению 2-ой очереди проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2 Программы)

Работы должны проводиться в рамках критической технологии «Технологии биоинженерии». Работы должны соответствовать по предполагаемому исполнению лучшим мировым стандартам. В результате выполнения каждой работы должен быть создан необходимый потенциал, обеспечивающий переход к проведению опытно-конструкторских работ с целью последующей коммерциализации. Результаты работ должны способствовать дальнейшему инновационному развитию российских технологий в данном приоритетном направлении Программы.

Соисполнители

Организация

АО "Вектор-Бест"

Этапы проекта

09.04.2007 - 31.08.2007

- Проведен анализ научно-технической литературы и патентов, относящейся к разрабатываемой теме;
- Проведен подбор (молекулярный дизайн) праймеров и флуорогенных гибридизиционных зондов для выявления ДНК ВГВ и РНК ВГС методом амплификации в режиме реального времени;
- Оптимизирован составов ПЦР смеси и режимов амплификации для эффективного определения ДНК вируса гепатита В и для однопробирочного определения РНК вируса гепатита С.

01.09.2007 - 07.12.2007

- Выбран и оптимизирован процесс выделения вирусных ДНК и РНК из сывороток и плазмы;
- Выбран и отработан метод концентрирования вирусного материала из сывороток (без ультрацентрифугирования);
- Отработан метод изготовления магнитных наночастиц;
- Оптимизирован процесс магнитоуправляемого выделения нуклеиновых кислот;
- Составлен промежуточный научно-технический отчет, включающий:
- лабораторные методики по выделению нуклеиновых кислот;
- лабораторные методики по концентрированию вирусного материала;
- лабораторные методики по изготовлению магнитных наночастиц.

01.01.2008 - 31.05.2008

Отработаны методы синтеза, характеризации и испытания олигонуклеотидных праймеров;
  Отработаны методы синтеза, характеризации и испытания флуорогенных гибридизиционных зондов; разработаны контрольные образцы;
  Созданы штаммы-продуценты и методы получения ферментов для ПЦР анализа (рекомбинантной Taq полимеразы и MMLV обратной транскриптазы), для обеспечения
повышенных требований разрабатываемого метода ПЦР анализа и пригодных для сухих ПЦР-смесей.
  Разработаны лабораторные методики синтеза праймеров и зондов.

01.06.2008 - 31.10.2008

Разработаны композиции наборов, позволяющие выявлять вирусы гепати-тов С и В с высокой чувствительностью (не хуже 25 копий ДНК вируса гепа-тита В и 50 копий РНК вируса гепатита С в мл сыворотки).
  Разработаны методы приготовления стабильных при хранении сухих ком-понентов диагностических наборов, обеспечивающих необходимые условия транспортировки и хранения:
  Для количественной оценки результатов работы созданы стандартные об-разцы, охарактеризованные относительно международного стандарта.
  Спроектирован и организован опытно-экспериментальный участок, обору-дованный сгласно требованиям, предъявляемым к лабораториям ПЦР-диагностики.