«Разработка методов и условий изготовления стандартных антигенов вирусов с низкой репродуктивной активностью для создания диагностических тест-систем, выявляющих IgG и IgM антитела, на примере вируса краснухи»

Объектом исследования являются два штамма вируса краснухи, принадлежащих к разным генотипам (1E и 1g), предполагающиеся для изготовления стандартного антигена вируса краснухи с целью изготовления в будущем диагностических тест-систем для выявления заболевания краснухой.
Целью данной работы является получение новых научных результатов, актуальных для инновационного развития российских технологий по приоритетному направлению науки и техники «Живые системы»; развитие ведущей научной школы Российской Федерации.
В частности выполнены:
- Разработка методологии получения антигенов для вирусов, обладающих низкой репродуктивной активностью и актуальных для инновационного развития российских технологий по приоритетному направлению науки и техники «Живые системы».
- Разработка методической базы с целью обеспечения потребностей Российских фирм стандартными антигенами для изготовления диагностических тест-систем, предназначенных для своевременного обнаружения патогенов на ранней стадии заболевания и подтверждения иммунного статуса вакцинированного и переболевшего населения.
  - Развитие ведущей научной школы Российской Федерации, путем активного вовлечения в научный и технологический процесс аспирантов и молодых исследователей.
  - Развитие имеющейся материальной базы для последующей коммерциализации результатов исследования
Календарный план выполнения работ по данной теме включал один этап. В ходе выполнения работ этого этапа проведены работы по адаптации штаммов вируса краснухи, принадлежащих к разным генотипам, к культурам клеток различного происхождения и выявление штамма вируса, обладающего наивысшей репродуктивной активностью на одной из культур клеток.
Исследована репродукция двух генотипов вируса краснухи в различных культурах клеток, в течении серийных пассажей. Выбраны культура клеток, обеспечивающая самый высокий выход вируса, и штамм вируса, обладающий наивысшей репродуктивной активностью в данной культуре клеток. Получены положительные результаты по концентрированию вируса в системе ультрафильтрации VivaFlow. Произведена количественная оценка содержания вирусной РНК в препаратах, полученных при роллерном культивировании, и в концентратах вируса методом ОТ-ПЦР в реальном времени. Установлено, что один из штаммов достигает максимального накопления в культуре клеток обезьяньего происхождения (Vero) и может быть использован для изготовления антигена вируса краснухи.

В работе был использован широкий спектр современных теоретических, молекулярно-биологических, вирусологических и биотехнологических методов исследования.
Кроме того, по теме работы проведены патентные исследования и представлен отчет по ГОСТ 15.011-96.

Выводы – Все запланированные работы выполнены полностью, цель достигнута.

Перечень ключевых слов - вирус краснухи, генотип вируса, культура клеток, культивирование, ультрафильтрация, обратная транскрипция -полимеразная цепная реакция.