Создание лабораторно-экспериментальной комбинированной вакцины против гепатита С на основе синтетических пептидов, рекомбинантных белков и ДНК-плазмид, представляющих иммунодоминантные В- и Т-клеточные эпитопы вируса гепатита С

1. Проведен анализ 254 научных публикаций в российских и зарубежных рецензируемых журналах с целью выявления известных В- и Т-клеточных эпитопов белков вируса гепатита С (ВГС), а также кандидатных вакцин против гепатита С.
2. Выполнено патентное исследование на основе 413 патентных документов по ГОСТ 15.011-96 по разрабатываемым вакцинам против гепатита С и иммунодоминантным эпитопам ВГС.
3. Разработан план и определены методы проведения исследования по теме проекта.
4. Синтезированы 7 олигопептидов, имитирующие иммунодоминантные Т-клеточные эпитопы белка NS5 ВГС.

1. Получены рекомбинантные ДНК-плазмиды, содержащие гены структурного белка (core) и неструктурных белков NS3, NS4 и NS5A ВГС. Экспрессия генов осуществлена в бактериальной системе. Рекомбинантные белки очищены, изучены их иммунохимические и антигенные свойства.
2. Для эукариотической системы экспрессии созданы ДНК-плазмиды, кодирующие структурный (core) инеструктурный (NS5A) белки вгс.
3. Проведены эксперименты по трансфекции эукариотических клеток культуры созданными ДНК-плазмидами. Установлена способность плазм ид синтезировать белки core и NS5A ВГС в клетках млекопитающих.

У пациентов с хроническим гепатитом С выявлена достоверная зависимость между присутствием антител к белкам NS4 и NS5A и активностью гепатита, а также стадией заболевания.
  Полученные данные явились основанием для выбора иммунодоминантных эпитопов белков NS4 и NS5A ВГС для включения в состав мультиэпитопной кандидатной вакцины.
  Показано, что иммунизация мышей рекомбинантными белками NS4 и NS5 индуцирует гуморальный и Т-клеточный ответы, которые, однако, не достигали максимальных значений, стимулируемых ВГС у больных
  В результате использования в качестве адъюванта иммуномакса пролиферация Т-клеток при ДНК-иммунизации возрастала в 3-4 раза.