Разработка метода молекулярной диагностики болезни Альцгеймера

Подтверждена роль изомеризации аспартата-7 в цинк-зависимой олигомеризации бета-амилоида, что предоставило дополнительное научное обоснование использования изомеризованной изоформы бета-амилоида в качестве биомаркёра болезни Альцгеймера;
  Разработан протокол выделения фракции бета-амилоида из биологического образца для последующего масс-спектрометрического анализа;
  разработан и протестирован протокол оптимизации режимов масс-спектрометрии для определения исходных и фрагментационных ионов бета-амилоида;;
  подготовлена патентная заявка «Способ идентификации изомеризованного аспартата в белках, отличающийся тем, что определение изоформ аспартата производится с помощью масс-спектрометрии с преобразованием Фурье»;

  разработан протокол клинического исследования репрезентативной выборки диагностируемых в рамках проведения НИР пациентов с болезнью Альцгеймера.

Собрано 32 образца плазмы крови пациентов, находящихся на раз-личных стадиях болезни Альцгеймера, и 30 образцов плазмы крови относительно здоровых людей.
  На основе использования денатурирующей гель-фильтрации была разработана методика фракционирования, растворов, моделирую-щих плазму крови.
  Разработана методика разделения модельных бинарных смесей пеп-тидов norA?(1-16) и isoA? (1-16) с использованием высокоэффектив-ной жидкостной хроматографии.
  На основе масс-спектрометрии сверхвысокого разрешения был раз-работан количественный метод определения относительного содер-жания пептидов norA? (1-16) и isoA? (1-16) в бинарных смесях.

Успешно апробирована на начальной выборке биообразцов тест-система молекулярной диагностики болезни Альцгеймера.

Определен оптимальный метод пробо-подготовки и фракционирования. Проведена валидация тест-системы. Разработана методика контроля характеристик диагностической тест-системы.