Реконструкция метаболизма бактерий с помощью сенсорных РНК и получение на этой основе штаммов-продуцентов

Стадии проекта

Предложение принято

Конкурс завершен

Проект закончен

Проект

02.512.11.2078

Организация

ФГУП "ГосНИИгенетика"

Руководитель работ

Миронов Александр Сергеевич

Продолжительность работ

2007, 8 мес.

Бюджетные средства

4,3 млн

Внебюджетные средства

0,86 млн

Конкурс

Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2 Программы)

Работы должны проводиться в рамках критической технологии «Технологии биоинженерии». Работы должны соответствовать по предполагаемому исполнению лучшим мировым стандартам. Создаваемый научно-технический задел должен обеспечивать в будущем проведение опытно-конструкторских и технологических работ на конкурентном уровне. Результаты работ должны способствовать дальнейшему инновационному развитию российских технологий в данном приоритетном направлении Программы.

Соисполнители

Организация

РХТУ им. Д.И. Менделеева

Этапы проекта

27.02.2007 - 31.07.2007

1. Цель I этапа работы:
Изучить возможность использования нового регуляторного элемента клетки — сенсорных РНК для модуляции активности целевых генов и направленной реконструкции бактериального метаболизма
2. Результаты работы по I этапу:
Построена модель вторичной структуры сенсорной РНК rib-оперона с использованием алгоритма Цукера-Тернера. Методами химического и энзиматического пробинга сенсорной РНК rib-оперона определен ее фолдинг и идентифицированы структуры, существенные для связывания молекул метаболитов-эффекторов. Получена коллекция мутаций в лидерной области rib-оперона с измененной регуляцией в отношении негативного действия фолатов. Изучена экспрессия модельных генов rib-оперона и pubE на фоне различных мутаций, затрагивающих активность соответствующих сенсорных РНК.

01.08.2007 - 31.10.2007

1. Цель II этапа работы:
Осуществить перенос мутаций в лидерной области rib-оперона в геном полученного ранее штамма-продуцента рибофлавина B. subtilis Y25. Изучить продуктивность полученных штаммов с модифицированной сенсорной РНК в условиях ферментации. Оценить возможность создания конкурентоспособной технологии производства рибофлавина на основе полученных продуцентов.
2. Результаты работы по II этапу:
Осуществлен перенос мутаций в лидерной области rib-оперона в геном полученного ранее штамма-продуцента рибофлавина B. subtilis Y25. Показано, что внесение ряда мутаций в лидерной области rib-оперона в геном этого штамма приводит к повышению продукции рибофлавина на 10-30%. Оптимизированы условия ферментации штаммов-продуцентов рибофлавина B. subtilis Y25, содержащих дополнительные мутации в лидерной области rib-оперона. Проведена оценка возможности создания конкурентоспособной технологии производства рибофлавина на основе полученных продуцентов. Проведен дополнительный патентный поиск в соответствии с ГОСТ Р15.011-96. Сделано заключение, что полученные в ходе работы штаммы являются перспективными для создания конкурентоспособной, ресурсосберегающей и эффективной технологии микробиологического синтеза рибофлавина.